【摘 要】
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以甘蓝型油菜‘德油五号’基因组DNA为模板,通过反向PCR扩增得到肌醇半乳糖苷合成酶基因(BnGOLS1)启动子片段,长度为827bp。PLACE和PlantCARE启动子预测工具分析表明:序列中
【机 构】
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北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室,
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以甘蓝型油菜‘德油五号’基因组DNA为模板,通过反向PCR扩增得到肌醇半乳糖苷合成酶基因(BnGOLS1)启动子片段,长度为827bp。PLACE和PlantCARE启动子预测工具分析表明:序列中含有TATA-Box、CAAT-Box等基本转录元件,以及ABRE、DRE、HSE、w-Box等顺式作用元件。将克隆得到的BnGOLS1启动子取代pBI121中的CaMV35S启动子,构建BnGOLS1启动子控制报告基因的GUS表达载体pBI-GS-GUS,通过农杆菌介导的方法在油菜组织中进行瞬时表达。GUS染色结果表明BnGOLS1启动子可以驱动GUS基因在油菜组织中的表达。
The BnGOLS1 promoter fragment was amplified by reverse PCR using the genomic DNA of ’DeYou No.5’ as a template, with a length of 827 bp. PLACE and PlantCARE promoter prediction tools showed that the sequences contained basic transcription elements such as TATA-Box and CAAT-Box, as well as cis-acting elements such as ABRE, DRE, HSE and w-Box. The cloned BnGOLS1 promoter was substituted for the CaMV35S promoter in pBI121, and the GUS expression vector pBI-GS-GUS for the BnGOLS1 promoter control reporter gene was constructed and transiently expressed in the canola tissue by Agrobacterium-mediated transformation. GUS staining results show that BnGOLS1 promoter can drive GUS gene expression in canola tissue.
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