【摘 要】
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目的 分析核黄素光化学技术(VB2-PRT)处理与否的贮存d1和d5血小板微小RNA(miRNA)表达谱的变化,探讨VB2-PRT处理miRNA参与调控血小板发生贮存损伤(PSL)的分子机制.方法 留取无
【机 构】
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山东省血液中心,山东济南250014
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目的 分析核黄素光化学技术(VB2-PRT)处理与否的贮存d1和d5血小板微小RNA(miRNA)表达谱的变化,探讨VB2-PRT处理miRNA参与调控血小板发生贮存损伤(PSL)的分子机制.方法 留取无偿献血者单采血小板20(人)份(5 mL/份),混合摇匀后均分为2等份,1份为VB2-PRT处理组(E组):使用终浓度为50 μmol/L VB2和6.24 J/mL紫外线(UV)B光处理8 min;另1份为对照组(C组):不做处理;2组皆贮存于(22±2)℃恒温血小板振荡保存箱中.在贮存d1和d5分别取样(5mL),分别命名为E1、E5、C1和C5组,采用纳米球(DNB)测序技术对其做血小板miRNA组测序,采用DEGseq和MA-plot分析软件筛选E和C组间差异表达的小RNA,当E和C组间的血小板miRNAs表达差异≥2倍(P＜0.01)时,对这部分血小板miRNA做靶基因预测及GO功能富集和KEGG信号通路富集分析.结果 E1和C1组血小板miRNA的表达谱相比:在E1组中筛选出487个表达差异明显(P＜0.01)的miRNAs,包括220个miRNAs表达上调,如miR-146a和let-7b等,267个表达下调,如miR-7和miR-1260等;E5和C5组血小板miRNA的表达谱相比:在E5中筛选出229个表达差异明显(P＜0.01)的miRNAs,包括80个miRNAs表达上调,如miR-423和miR-378等,149个表达下调,如miR-451和miR-30等.E1与C1组以及E5与C5组的差异表达miRNAs靶基因呈明显富集的GO条目(term)数相似,包括细胞组分、细胞器、细胞膜等细胞结构,黏附、催化、分子转换、运输、转录因子和受体活性等分子功能,细胞加工、代谢、生物调节、应激等生物过程.E5与C5组相应的KEGG富集前10的通路中,较E1与C1组不同的是缺少涉及环境适应、翻译和黏蛋白合成信号通路,却增加了肌醇磷酸代谢、磷脂酰肌醇信号系统和趋化因子信号通路.结论 经VB2-PRT处理的血小板贮存一段时间其miRNAs表达谱发生明显变化;功能预测提示这些miRNA可能参与VB2-PRT处理下血小板发生PSL的调控.
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