【摘 要】
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目的构建人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因原核表达载体,并检测表达的重组人IGF-1（rhIGF-1）蛋白的生物学活性。方法以pUC57-hIGF-1质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因,克隆入pTEtrans
【机 构】
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上海美恩生物技术有限公司,同济大学生命科学与技术学院
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目的构建人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因原核表达载体,并检测表达的重组人IGF-1（rhIGF-1）蛋白的生物学活性。方法以pUC57-hIGF-1质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因,克隆入pTEtrans载体,进行DNA序列分析后,亚克隆入表达载体pTE,转化大肠杆菌W3110,进行诱导表达,表达产物经阳离子交换层析和凝胶过滤层析纯化,并进行Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析。MTT法检测rhIGF-1促MCF-7细胞的增殖作用。结果转化质粒pTE-hIGF-1
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