不同形式CA16病毒颗粒的分离鉴定与免疫原性初步分析

来源 :中国新药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fpkneo
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目的:制备不同形式的CA16病毒颗粒,并对其免疫原性进行初步分析。方法:采用蔗糖密度梯度超速离心法和阴离子交换层析法,将CA16病毒进行分离纯化,收集相应组分,测定各组分抗原、蛋白含量,并进行SDS-PAGE、Western Blot、电镜鉴定。将分离到的不同病毒颗粒组分分别免疫小鼠,于0,14和28 d腹腔注射接种3次,末次免疫后14 d眼眶采血、分离血清。采用微量细胞病变抑制法检测血清中抗CA16病毒中和抗体效价。结果:CA16病毒液经超速离心和阴离子交换层析后,可分离得到2种形式的病毒颗粒:EP和FP。电镜下EP表现为空心颗粒、FP为实心颗粒。SDS-PAGE结果显示:EP可见VP0,VP1,VP3蛋白条带;FP可见VP1,VP2,VP4蛋白条带。EP,FP免疫小鼠后,均可诱导产生针对CA16病毒的中和抗体,但EP诱导产生的中和抗体效价远低于FP,两者间具有统计学差异。结论:体外培养的CA16病毒存在EP和FP 2种病毒颗粒形式,二者均具有免疫原性,但FP高于EP。
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