16S-23S rDNA间隔区序列寡核苷酸探针对结核患者痰标本的检测

来源 :黑龙江科技学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenlingqiang6268047
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目的应用结核分枝杆菌特异的寡核苷酸探针杂交检测结核患者痰标本中的结核分枝杆菌,以评价其在临床应用中的价值. 方法对生物素标记5-端的一个20bp的寡核苷酸探针的敏感性、特异性的研究,并应用该探针对90例结核患者和30例非结核患者痰标本进行了检测. 结果寡核苷酸探针分别检测基因组DNA、350bp PCR扩增产物、250bp PCR扩增产物的敏感性分别为55 ng,0.5 ng,0.1 ng.探针检测特异性实验表明探针检测基因组DNA、350bp PCR扩增产物特异性较差,检测250bp PCR扩增产物则只与结核分枝杆菌杂交.探针检测90例结核患者痰标本结果表明:探针杂交检测临床标本基因组DNA、350bp PCR扩增产物、250bp PCR扩增产物的阳性率分别为33%、83%、80%,而扩增产物电泳阳性率为64%.寡核苷酸探针与30例非结核患者痰标本基因组DNA及PCR扩增产物杂交则全为阴性. 结论寡核苷酸探针化学发光检测临床标本250bp PCR扩增产物,能提高结核患者痰标本检测的敏感性与特异性.
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