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2A肽介导猪PID1与CuZnSOD双基因真核共表达载体的构建与细胞表达

来源 :生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shuizhongcanyue

【摘 要】

：

构建PID1基因与CuZnSOD基因的真核共表达载体,在PK15细胞中鉴定基因的表达。PCR扩增的PID1与CuZnSOD两基因分别经双酶切后定向插入pIRES2-AcGFP1空载体,构建pIRES2-CuZnSOD-P

【作 者】

：

张哲 李同明 曾勇庆 陈伟 徐正刚 杨云 房国锋 王守栋 楚 

【机 构】

：

山东农业大学动物科技学院动物遗传育种学实验室

【出 处】

：

生物学杂志

【发表日期】

：

2014年6期

【关键词】

：

2A肽 PID1 CUZNSOD 真核共表达载体 PK15细胞 2A peptide  PID1  CuZnSOD  eukaryotic co-express 

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划（863计划）重点项目（编号：2008AA101008）, 国家转基因重大专项（编号：2013ZX08006-002,2011ZX08006-002）, 山东省现代农业（生猪）产业技术体系建设专项（编号：SDAIT-06-022-03）, 山东省农业良种工程重大项目（编号：2013LZ02-015）

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构建PID1基因与CuZnSOD基因的真核共表达载体,在PK15细胞中鉴定基因的表达。PCR扩增的PID1与CuZnSOD两基因分别经双酶切后定向插入pIRES2-AcGFP1空载体,构建pIRES2-CuZnSOD-PID1真核双表达载体并进行测序与酶切鉴定。采用脂质体转染法将重组质粒转染至PK15细胞,细胞内荧光显微镜下观察其荧光的表达,RT-PCR、Westernblot技术分别检测PID1基因与CuZnSOD基因mRNA和蛋白表达情况。重组克隆载体插入目的片段序列与PID1基因与CuZnSOD基因

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