应用水痘-带状疱疹病毒报告细胞系筛选抗病毒药物的研究

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mumuww
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目的 应用构建的水痘-带状疱疹病毒(VZV)报告细胞系MV9G建立一种筛选抗VZV药物的新方法。方法 将VZV疫苗株(vOka)的无细胞病毒液(CFV)直接感染MV9G细胞2h后移除(CFV直接感染法),或将感染vOka株的MeWo细胞(含带细胞病毒,CAV)与MV9G细胞共培养48 h(CAV共培养法),以激发MV9G细胞表达报告基因萤火虫荧光素酶。在培养基中加入肝素、磷酸甘露糖(M-6-P)、阿昔洛韦(ACV)、白藜芦醇、roscovitine等抗病毒药物,通过比较加药前后MV9G细胞荧光素酶活性变化来分析药物对VZV的作用。结果 抗病毒药物各浓度组不同程度地抑制CFV直接感染和/或CAV共培养激发的MV9G细胞荧光素酶活性,荧光素酶活性的降低与平行对照组中病毒蚀斑数的降低一致。抗病毒药物中肝素、M-6-P和roscovitine 2.5 μmol/L组抑制CFV激发荧光素酶的作用强于抑制CAV激发荧光素酶的作用,而ACV和白藜芦醇抑制CAV激发荧光素酶的作用强于抑制CFV激发荧光素酶的作用。ACV抗药株Kanno和rOka YSR的CAV与MV9G细胞共培养均激发其强表达荧光素酶,但ACV抑制抗药株激发荧光素酶50%时浓度(IC50)显著高于抑制敏感株pOka和CaGu的IC50。结论 CFV直接感染法和CAV共培养法分别有助于筛选针对VZV感染早期和后期的药物,利用MV9G细胞建立的报告细胞法可为抗VZV药物筛选和作用机制研究提供一种简便、快速、敏感和高通量的新方法。
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