【摘 要】
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目的 建立冠状搭桥手术(CABG)中桥血管动物模型,桥血管壁转染人内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因并验证转染效果.方法 家兔40只,随机分为4组(n=10),自体股动脉移植建立动脉桥血管模型:(1) eNOS组,股动脉转染eNOS基因后移植为桥血管;(2)空载基因组,股动脉转染空载eNOS基因后移植为桥血管;(3)对照组,股动脉仅移植为桥血管,不进行基因转染;(4)正常股动脉组.基因转染采用浸泡
【机 构】
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目的 建立冠状搭桥手术(CABG)中桥血管动物模型,桥血管壁转染人内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因并验证转染效果.方法 家兔40只,随机分为4组(n=10),自体股动脉移植建立动脉桥血管模型:(1) eNOS组,股动脉转染eNOS基因后移植为桥血管;(2)空载基因组,股动脉转染空载eNOS基因后移植为桥血管;(3)对照组,股动脉仅移植为桥血管,不进行基因转染;(4)正常股动脉组.基因转染采用浸泡法转染腺病毒封装的eNOS基因组或空载eNOS基因组.3周后获取桥血管、正常颈动脉以及股动脉标本,通过免疫组织化学法检测组织中一氧化氮(NO)含量、eNOS活力测定和eNOS蛋白采用Western blot等方法,观察和证实转染的效果和效率.结果 本组兔无死亡,桥血管通畅.模型中各组桥血管均可见不同程度的适应性改变.其中eNOS组血管壁增厚,eNOS蛋白表达明显增多;对照组和空载基因组可见血管壁变性,eNOS蛋白不表达或表达极少(P<0.05).eNOS组动脉管壁NO含量及总eNOS活力分别为(8.83±1.24) μmol/g和(0.987±0.239) U/mg,远高于其他3组(P<0.05).Western blot分析也证明eNOS组血管壁eNOS蛋白含量明显增多,与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 此动物模型有一定实用性.可以借助eNOS基因转染增加动脉桥血管壁eNOS表达及活力,进而增加NO在局部的含量及表达。
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