转录调节因子p8分泌表达载体的构建及在Fx293细胞中的表达

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hmgujie
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目的:构建可以产生分泌型转录调节因子p8重组蛋白的载体,期望进一步研究p8的功能。方法:利用定点诱变的方法在pDisplay表达载体中去除HA和Myc标记序列,保留小鼠Igκ信号肽和PDGFR跨膜结构域。在小鼠Igκ信号肽后是外源p8、凝血因子Xa识别位点和Flag序列,与PDGFR跨膜结构域形成融合基因。PCR扩增得到完整表达片段后用于慢病毒载体上的克隆,之后在包装细胞Fx293中产生重组慢病毒用于后续实验。结果:经测序证实所构建的质粒序列与预期序列一致,酶切和PCR验证质粒构建正确,体外转染Fx293
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