【摘 要】
：
目的 观察甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-azaC)对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1生长的抑制作用及对抑癌基因Dickkopf同源序列3(DDK3)的转录调节作用.方法 经2、5、10、20、50、100、200、400 μmol/L的5-azaC处理TPC-1细胞后,采用噻唑蓝(MTT)观察药物对细胞的生长抑制作用；以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞经5、1
【机 构】
：
450052郑州大学第一附属医院甲状腺外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,450052郑州大学第一附属医院甲状腺外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,450052郑州大学第一附属医院
论文部分内容阅读
目的 观察甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-azaC)对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1生长的抑制作用及对抑癌基因Dickkopf同源序列3(DDK3)的转录调节作用.方法 经2、5、10、20、50、100、200、400 μmol/L的5-azaC处理TPC-1细胞后,采用噻唑蓝(MTT)观察药物对细胞的生长抑制作用；以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞经5、10、20、50 μmol/L的5-azaC处理后DKK3基因mRNA的表达及DKK3基因甲基化状态.结果 经不同浓度5-azaC处理TPC-1细胞后,MTT检测到细胞的生长受到抑制,且呈时间和剂量依赖性(P＜0.05)；经5、10、20、50 μmol/L的5-azaC处理48 h后,DKK3 mRNA相对表达量分别为0.208±0.017、0.365±0.013、0.489±0.017、0.582±0.011,表达强度与5-azaC浓度呈剂量依赖关系(F=370.356,P＜0.01)；MSP检测结果显示,经5-azaC处理后,DKK3基因启动子高甲基化的区域发生去甲基化.结论 5-azaC能有效逆转TPC-1甲状腺乳头状癌细胞DKK3基因的异常甲基化,从而激活DKK3基因表达,抑制肿瘤细胞生长。
其他文献
脊髓损伤是一种临床上常见的高致残性疾病,也是临床疑难病之一,其治疗困难.研究结果显示[1-4],嗅鞘细胞(OECs)移植能够促进脊髓损伤后神经修复和轴突再生.我们通过不同剂量OECs静脉移植治疗脊髓损伤,观察疗效移植剂量的关系。
目的 观察过表达细胞周期相关转录因子1(E2F-1)的MGC-803稳定株所制成的细胞抗原所引起的树突状细胞(DC)介导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外杀伤胃癌MGC-803细胞的作用.方法 用30μg/L重组人白细胞介素4(rhlL-4)、100 μg/L重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(rhGM-CSF)、50 μg/L重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)和100 μg/L脂多糖(LPS)联
脑出血可直接造成脑组织损害、水肿、移位甚至脑积水等,可继发颅内一系列病理生理改变,引起诸多并发症,威胁患者的生存和预后[1].目前,关于脑出血的治疗仍局限于内科对症治疗和侵袭性外科手术处理,对于伴有严重神经功能缺损的脑出血幸存患者,仍缺乏有效的治疗手段来改善或消除他们的症状.我们采用针刺配合中西药治疗脑出血术后合并神经功能缺损的患者,现报道如下.一、资料与方法1.患者和分组:2008年10月～20
目的 探讨百里醌联合阿霉素对人骨肉瘤细胞生长的影响及其机制.方法 应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测bax及B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)的表达；建立裸鼠骨肉瘤皮下移植瘤模型,计算抑瘤率,免疫组织化学法检测裸鼠肿瘤组织中细胞核增殖抗原(Ki-67)、bax及bcl-2的表达.结果 阿霉素或百里醌单独及阿霉素联合百里醌作用骨肉
重度心肌挫伤者(SMC)可导致死亡,造成严重的临床后果.我们在前期实验中已经制成开放式犬SMC模型[1],我们在犬SMC后用1,6二磷酸果糖(FDP)干预观察其能否有效改善心肌葡萄糖代谢变化,是否有利于挫伤心脏功能的恢复,为寻找更有效心肌能量代谢药物提供参考。
目的 观察肺癌肿瘤抑制物1(TSLC1)和CD105标记的微血管密度计数(MVD)在食管癌组织中的表达.方法 采用免疫组织化学法检测45例食管癌患者手术切除的癌组织和癌旁组织中TSLC1和CD105标记的MVD表达.结果 TSLC1在食管癌组织中的阳性表达率为42.22％(19/45),明显低于癌旁组织阳性表达率91.11％ (41/45),两者差异有统计学意义(P＜0.01),CD105标记的M
目的 构建大鼠腹主动脉瘤模型并观察大鼠腹主动脉瘤中骨桥蛋白(OPN)及核因子-κB(NF-κB)的表达,探讨大鼠腹主动脉瘤发生的分子机制.方法 将30只大鼠分为3组,每组10只,用酶灌注法灌注30 min构建大鼠腹主动脉瘤模型；测量动脉直径；苏木素-伊红(HE)染色及特殊染色检测主动脉的结构改变及炎性细胞浸润；免疫组织化学技术、Western blot法检测动脉组织中OPN、NF-κB及基质金属蛋
目的 瘤体注射Cbl-b基因真核表达质粒[短发卡RNA (shRNA)-Cbl-b]转染T淋巴细胞,观察前列腺癌小鼠肿瘤生长及机体免疫水平变化.方法 尼龙毛柱法提取小鼠脾脏T淋巴细胞,质粒转染shRNA-Cbl-b至T淋巴细胞；瘤体注射shRNA-Cbl-b T淋巴细胞至RM-1前列腺癌小鼠肿瘤部位,每周1次,共4次；Western blot法检测荷瘤小鼠肿瘤组织中Cbl-b蛋白的表达,测量小鼠肿
经鼠尾静脉注射给药或细胞回输治疗是免疫学小鼠动物实验中的常用操作技术[1],我们通过比较小鼠鼠尾静脉的不同注射方法,寻找穿刺成功率更高、安全、可靠的方法.一、材料与方法1.材料:C57 BL/6小鼠560只,体质量约18 ～20 g健康小鼠,购自河北省实验动物中心(许可证编号:SCXK冀2008-1-003).饲养于河北省实验动物中心(SPF级动物实验室),实验室许可证号:SYXK(冀)2008-
目的 检测趋化因子受体4 (CXCR4)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌及其脑转移癌组织中的表达,探讨其在肺癌发生、发展及转移中的意义.方法 通过免疫组织化学方法检测41例肺源性脑转移癌组织、16例源性肺癌组织中CXCR4、VEGF和CD34的表达.结果 CXCR4、VEGF蛋白在肺源性脑转移癌组织有明显表达,阳性表达率分别为92.68％和80.24％.其中16例具有肺原发灶的脑转移癌,阳性表