PGEM-T/TIMP-1重组质粒的构建及其在体外转录法合成dsRNA中的作用

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gaolch011

【摘要】

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目的构建大鼠PGEM-T/TIMP-1重组质粒,获得TIMP-1基因的dsRNA.方法RT-PCR获得TIMP-1cDNA,克隆于PGEM-T载体上,PCR鉴定并进行序列分析;以PGEM-T/TIMP-1重组质粒为模板,PCR获得

【作者】

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徐华锋邹海峰刘洋林平司云峰于洪伟于晓光

【机构】

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哈尔滨医科大学,哈尔滨市红十字中心血站

【出处】

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哈尔滨医科大学学报

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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TIMP-1 T7启动子 RNAi dsRNA

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目的构建大鼠PGEM-T/TIMP-1重组质粒,获得TIMP-1基因的dsRNA.方法RT-PCR获得TIMP-1cDNA,克隆于PGEM-T载体上,PCR鉴定并进行序列分析;以PGEM-T/TIMP-1重组质粒为模板,PCR获得带有T7启动子的TIMP-1 cDNA;体外转录获得TIMP-1dsRNA.结果RT-PCR及测序分析证明成功构建PGEM-T/TIMP-1重组质粒;并获得带有T7启动子的TIMP-1cDNA以及TIMP-1dsRNA.结论成功构建PGEM-T/TIMP-1重组质粒,并获得TIMP-1dsRNA,为RNAi实验奠定了基础.

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