【摘 要】
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目的 检测咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)患儿外周血中微小RNA-138(microRNA-138,miR-138)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,RUNX3)的表达水平及其对Th1/Th2平衡的调节作用.方法 选取CVA患儿65例纳入CVA组,健康儿童30例纳入健康对照组,采集两组儿童外周静脉血,分离培养CD4+T细胞.ELISA法检测CD4+T细胞分泌的干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)
【机 构】
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南阳市第一人民医院新生儿重症监护室,河南南阳473200
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目的 检测咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)患儿外周血中微小RNA-138(microRNA-138,miR-138)、Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3,RUNX3)的表达水平及其对Th1/Th2平衡的调节作用.方法 选取CVA患儿65例纳入CVA组,健康儿童30例纳入健康对照组,采集两组儿童外周静脉血,分离培养CD4+T细胞.ELISA法检测CD4+T细胞分泌的干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-4、IL-5和IL-13的水平;流式细胞仪检测Th1、Th2细胞比例;实时荧光定量PCR检测CD4+T细胞中RUNX3 mRNA水平和外周血中miR-138水平;Western blot检测CD4+T细胞中RUNX3蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验检测miR-138和RUNX3的靶向作用;RUNX3-mimic质粒转染至CD4+T细胞中,检测增加RUNX3的表达水平对IFN-γ、 IL-2、IL-4、IL-5、IL-13水平和Th1、Th2细胞比例的影响.结果 CVA组与健康对照组相比,CD4+T细胞分泌IFN-γ、IL-2水平降低,IL-4、IL-5和IL-13水平增加,Th1细胞比例和Th1/Th2比值降低,Th2细胞比例增加(P＜0.05).CVA组外周血中CD4+T细胞RUNX3 mRNA及其蛋白相对表达水平低于健康对照组(P＜0.001),miR-138的相对表达水平高于健康对照组(P＜0.001).miR-138可靶向调节RUNX3的表达.CD4+T细胞中RUNX3的表达增加后,IFN-γ和IL-2水平升高,IL-4、IL-5和IL-13水平降低,Th1细胞比例和Th1/Th2比值增加,Th2细胞比例降低(P＜0.05).结论 miR-138通过靶向RUNX3调节CVA患儿Th1/Th2平衡,为CVA的治疗提供了新方向.
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