【摘 要】
：
目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1 Gag P2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选.方法根据HIV-1 HXB2株PR DNA序列设计
【机 构】
：
第二军医大学微生物学教研室,上海,200433安徽医科大学病理学教研室,合肥,230032;上海长海医院输血科,上海,200433;上海市公共卫生中心,上海,201508;
论文部分内容阅读
目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1 Gag P2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选.方法根据HIV-1 HXB2株PR DNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1 PR的DNA编码序列,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体进行测序.将HIV-1 PR DNA克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE鉴定,并用HIV阳性血清进行免疫反应性的鉴定.结果合成的使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经测序显示其编码氨基酸序列与原始序列完全一致.所构建的HIV-1 PR原核表达质粒pQE30-pr,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为14 000的HIV-1 PR蛋白,纯化的目的蛋白浓度为7.74 mg/ml.ELISA检测该蛋白与HIV阳性血清呈特异性反应.结论已成功合成并克隆了使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1 PR的DNA编码序列,经表达及纯化的HIV-1 PR蛋白具有免疫学特性.
其他文献
高职学生自卑心理较重、自制力不足、思维模式与以往不同等特点导致了对学生管理工作的要求越来越高。运用对立统一原理、实践性原理、全面性原理、整体和局部原理、量变质变
摘要:贫困大学生一直是党政领导重视，社会关注的热点，难点问题。服务大学生特别是贫困大学生是有关部门的重要职责和任务。本文针对如何做好贫困生的资助工作提出了相应的对策。同时，提出了做好资助育人工作的观点及方法，经实践证明，这些方法是行之有效的。 关键词:贫困大学生 教育 资助 作者简介：花春飞，河南城建学院数理系；宁蕴绯，河南城建学院。 中图分类号：G647 文献标识码：A 文章编号：1009
[摘要]知识经济时代是一个全新的充满创新的时代，它的本质要求是创造，它需要创新的知识以及创新的人才。创新教育是培养学生创新精神和创新能力为基本价值取向的教育，它是素质教育的高层次，更成为了21世纪素质教育的必然选择。本文从注重培养学生的创新意识、创新技能以及创造性思维几个方面阐述创新教育在职校服装专业课教学中的体现。 [关键词]创新教育 创新意识 创新技能 创造性思维 [中图分类号]J704
本文在阐述高校人力资源管理信息化概念及意义的基础上，分析了当前高校中人力资源管理信息化的现状，提出了加强高校人力资源管理信息化建设中的对策，主要是：提高认识，保证人力资源
[摘要]声乐教学和其他学科教学相比，有很强的特殊性。这种特殊性表现在它的教学方法比较灵活自由，可以有效调动学生学习声乐的兴趣，提高学生演唱的能力。其中想象作为一种重要的艺术创造方法，对声乐演唱具有重要的作用。本文旨在分析想象在声乐教学中的重要性及其应用。 [关键词]声乐教学 演唱 想象 作用 运用 [中图分类号]G42 [文献标识码]A [文章编号]1009-5349（2012）12-0212
[摘要]当前中职教育正处于深化改革的重要阶段，寻求教学的改革是当前很多中职老师探索的重要课题。而课程教学模式改革是中职学校进行教学改革、提高教学效果的重要环节。本文通过对中职机械教学的改革和创新的探讨，为有效提高教学质量提供一定的借鉴意义。 [关键词]中职 机械专业 改革 创新 [中图分类号]G712 [文献标识码]A [文章编号]1009-5349（2012）12-0213-01一、当前中职
民办高职毕业生的生源主要由高考分数较低的学生和不经过高考的三校生组成。就读该校的学生具有文化基础较差、家庭经济条件有限以及自制力较差等特点。由于缺乏学习毅力以及
大学生创业观念已深入人心，但大学生创业失败案例比比皆是。本文探讨了大学生创业的重要意义，分析了大学创业失败之原因，并在此基础上提出了改变大学生创业失败的对策。
[摘要]《建筑材料》课程是通往专业课程的桥梁，也是决定学生专业面宽窄和工作适应性的关键因素。笔者根据对《建筑材料》课程的了解及教学经验，分析了本课程内容的特点与不足，从学生、教师和教学过程三方面所存在的问题进行本课程教学的探讨。 [关键词]建筑材料课程 不足 课程改革 [中图分类号]TU50-4 [文献标识码]A [文章编号]1009-5349（2012）12-0215-01《建筑材料》课程是