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将人神经营养因子－３（ｈＮＴ３）基因插入含内蛋白子－几丁质结合区（８ｎｔｅｉｎ－ＣＢＤ）片段的质粒ｐＴＸＢ１）的多克隆位点，构建成重组子ｐＴＸＢ－ｈＮＴ３，随后转化入Ｅ．ｃｏｌｉ２５６６并进行融合表达。表达产物包涵体经８ｍｏｌ／Ｌ脲变性，并在ＧＳＨ，ＧＳＳＧ存在下复性，复性后的融合蛋白经几丁质珠亲和柱吸附。待洗涤杂蛋白，加入５０ｍｍｏｌ／Ｌ ＤＴＴ在４℃或２５℃进行剪切反应４８ｈ，再用缓冲液洗，即