【摘 要】
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目的 建立环境中砷的生物检测方法.方法 根据GenBank中已发表的革兰阳性菌中参与砷抗性机制的操纵子序列R46 ars,人工合成arsR全部序列(含小部分arsD基因序列)及其上游的启动
【机 构】
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绍兴文理学院元培学院生命科学系,浙江绍兴,312000
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目的 建立环境中砷的生物检测方法.方法 根据GenBank中已发表的革兰阳性菌中参与砷抗性机制的操纵子序列R46 ars,人工合成arsR全部序列(含小部分arsD基因序列)及其上游的启动子序列,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,构建含砷离子特异性诱导启动子表达载体pET28a(+)-ars-gfp,并采用感受态转化法将该重组表达载体转化入大肠埃希菌表达宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)中,构建砷离子检测菌株,并进行PCR和酶切鉴定.结果 通过PCR和酶切鉴定,表明重组表达载体成功构建并转化入大肠杆菌E.coli BL21 (DE3),绿色荧光蛋白报告基因在有砷离子(0.2～1.0μmol/L)存在的环境中得到表达.结论 该菌株适用于环境中砷的生物检测.
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