探讨载脂蛋白E(ApoE)拟肽对创伤性脑损伤(TBI)小鼠神经元凋亡及自噬的影响及其作用机制。
方法健康成年雄性C57BL/6J小鼠40只，按随机数字表法分为假手术组、TBI+生理盐水组、TBI+低剂量COG1410组和TBI+高剂量COG1410组，每组10只。采用控制性皮质撞击(CCI)法建立中度TBI模型。假手术组只开骨窗，不进行撞击。造模后30 min TBI+低剂量COG1410组和TBI+高剂量COG1410组小鼠尾静脉注射COGl410溶液(剂量分别为1 mg/kg、2 mg/kg)，另外2组仅注射等量生理盐水。3 d后用转棒实验、改良神经功能缺损评分(mNSS)评价4组小鼠的神经功能；采用TUNEL、免疫荧光染色分别检测小鼠损伤灶周围皮层神经元的凋亡和自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达；采用Western blotting检测小鼠伤侧大脑半球凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3，自噬蛋白Beclin-1、和LC3-I、LC3-II的表达以及磷酸化蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素受体(mTOR)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)含量的变化。
结果与假手术组比较，TBI+生理盐水组小鼠转棒时间明显缩短，mNSS评分增加，脑Bax、Caspase-3蛋白表达增加，Bcl-2表达降低，TUNEL染色阳性神经元数量、Beclin-1和LC3-II蛋白的表达、LC3阳性神经元数量、p-Akt和p-mTOR含量均增加，差异有统计学意义(P<0.05)。与TBI+生理盐水组比较，TBI+低剂量COG1410组和TBI+高剂量COG1410组小鼠转棒时间增加，mNSS评分降低，脑Bax、Caspase-3蛋白表达降低，Bcl-2表达增高，TUNEL染色阳性神经元数量、Beclin-1和LC3-II蛋白表达、LC3阳性神经元数量均明显减少，p-Akt和p-mTOR含量增加，差异均有统计学意义(P<0.05)；与TBI+低剂量COG1410组比较，TBI+高剂量COG1410组转棒时间较高、mNSS评分较低、脑Bax、Caspase-3蛋白表达降低，Bcl-2表达增高，TUNEL染色阳性神经元和LC3阳性神经元数量、Beclin-1和LC3-II蛋白表达均降低，p-Akt、p-mTOR含量增加，差异有统计学意义(P<0.05)。
结论ApoE拟肽可以剂量依赖性地减少小鼠TBI后的自噬水平，从而减轻TBI后的神经元凋亡，其机制可能与调节AKt/mTOR相关通路有关。