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摘要 为生产出紫薯脱毒苗，进行了紫薯济薯18号脱毒苗的芽诱导及快繁技术研究。结果表明，济薯18号茎尖分生组织最佳芽诱导培养基为MS 0.6 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培养基中，当NAA浓度为1.0 mg/L时，茎的出芽和生根所需时间最短，培养28 d后叶片数和生根数也最多；但根长和株高在NAA浓度为0.1 mg/L时最高，说明NAA在较低浓度时促进根的生长。在6-BA浓度为0.1 mg/L时，株高最高，根最长；在6-BA浓度为1.0 mg/L时，脱毒苗的生根生芽时间最短，根数最多，叶片数也最多。
关键词 紫薯；济薯18号；脱毒苗；芽诱导；快繁技术
中图分类号 S531 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）15-0024-01
紫薯[Ipomoea batatas（L.）Poir.]属旋花科（Convolvulaceae）番薯属，又叫黑薯，其薯肉呈紫色至深紫色[1]。紫薯除了含有普通红薯的营养成分外，还富含硒元素和花青素等营养成分，及丰富的蛋白质、磷、铁及VC、VB、VA等[2]。实际生产中，紫薯病毒病是影响产量和品质的主要因素之一[3]。通过组织培养繁育紫薯脱毒苗是目前防治紫薯病毒病的有效途径之一[4]。本试验通过不同培养基和植物生长调节剂对济薯18号（山东省农业科学院作物所繁育）脱毒试管苗组培快繁进行研究，以期为济薯18号脱毒苗的快繁生产提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试紫薯品种为济薯18号，置于（30±2）℃温室中培养。
1.2 试验方法
1.2.1 培养基设计。MS培养基，pH值5.8～6.0，蔗糖含量3.0%，琼脂0.7%，诱导培养基中6-BA设3个浓度即0.4、0.6、0.8 mg/L、NAA设3个浓度即0.1、0.2、0.3 mg/L，共组合成9种培养基。
1.2.2 外植体接种。取济薯18号植株，去掉大部分叶片、叶柄后，先用0.1%洗衣粉液洗涤，再用蒸馏水清洗干净，置于超净工作台上进行灭菌处理（先在75%酒精中浸泡30 s，再用0.1% HgCl2溶液消毒15～20 min，再用无菌水清洗干净）。在超净工作台上将济薯18号脱毒苗修剪成段，截成1 cm左右并且带1～2个腋芽的小段，在设计好的培养基上进行接种。每瓶接种5个外植体，观察其生长状况。
1.2.3 培养条件。每处理接种9瓶、每瓶接种2株。置于28～30 ℃条件下，日光灯照射培养，光照11 h/d条件下培养[5-6]。
1.2.4 病毒检测。每试管紫薯苗取2片叶，采用斑点酶联免疫吸附测定法检测试管苗是否携带病毒[7-9]。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对脱毒苗的诱导
从表1可以看出，接种后的外植体经过12～20 d诱导，9种培养基上均可生长为体积比较大、质地致密的愈伤组织。所有培养基出愈率均为100%；除培养基M-6及M-9的出根率分别为25.0%和26.6%外，其余培养基的出根率均为100.0%。外植体在培养基M-1、M-2、M-4、M-5上可诱导出芽，其中培养基M-1、M-2出芽率均为100.0%，培养基M-4、M-5出芽率分别为33.3%和36.7%。外植体在培养基M-3、M-6、M-7、M-8、M-9上经过培养只能诱导出愈伤组织，不能诱导出芽。培养基M-1、M-2、M-4、M-5上诱导的外植体出芽平均时间分别为34、30、42、46 d。
2.2 脱毒苗的病毒检测
经检测，M-1、M-2、M-4、M-5培养基上诱导的紫薯苗脱毒率分别为100%、96%、95%和100%。
2.3 脱毒苗的快速繁殖
2.3.1 NAA对脱毒苗生长的影响。从表2可以看出，当NAA浓度为1.0 mg/L时，济薯18号脱毒幼苗5.8 d产生根原基，9.2 d开始出芽，28 d后根长4.5 cm、新生根数8.6条、叶片数4.6片、平均株高6.0 cm。当NAA浓度为0.1 mg/L时，根和茎生长较快，出芽和生根时间相对比较长，说明较低浓度的NAA不利于生根和出芽。当NAA浓度大于1.0 mg/L时，随着NAA浓度的不断提高，出芽及生根时间延长，根长、叶片数及株高不断降低，说明较高浓度NAA处理济薯18号对根、芽、叶片数、株高等的形成是不利的。由此可以说明，0.5～1.0 mg/L NAA能促进济薯18号脱毒试管苗的生长发育。
2.3.2 6-BA对脱毒苗生长的影响。从表3可以看出，不同浓度的6-BA对MS培养基中济薯18号脱毒苗的出芽时间、生根时间、生根数、根长、叶片数和株高均有一定影响。当6-BA浓度为1.0 mg/L时，脱毒苗出芽只需7.6 d，生根需要4.7 d，单株根数4.6条，单株叶片数4.5片。6-BA浓度为0.1 mg/L时，根最长，达5.5 cm，株高生长最快，达5.2 cm。当6-BA浓度为2.5、3.0 mg/L时，抑制了根的形成，幼根数目为0，但对叶片影响较小。说明当6-BA浓度为0.1～1.0 mg/L时，更有利于济薯18号脱毒苗根和芽的生长。
3 结论与讨论
本试验结果表明，济薯18号茎尖分生组织最佳芽诱导培养基为MS 0.6 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培养基中，当NAA浓度为1.0 mg/L时，茎的出芽和生根所需时间最短，培养28 d后叶片数和生根数也最多。但根长和株高在NAA浓度为0.1 mg/L时最高，说明NAA在较低浓度时促进根的生长。在6-BA浓度为0.1 mg/L时，株高最高，根最长；在6-BA浓度为1.0 mg/L时，脱毒苗的生根生芽时间最短，根数最多，叶片数也最多，说明较低浓度的6-BA有利于脱毒苗根和植株的生长。NAA和6-BA在根的数目和根的长度上NAA优于6-BA，在出芽和生根时间上6-BA较NAA快。
4 参考文献
[1] 曹秀敏，张明，熊法亭，等.平薯3号脱毒苗组培快繁技术研究[J].陕西农业科学，2008（6）：19-20.
[2] 段玉云，王新良，金月嵘，等.紫甘薯京薯6号脱毒苗的诱导与快繁[J].西南农业学报，2011，24（2）：835-837.
[3] 张雄坚，房伯平，黄宏城，等.南方薯区甘薯脱毒苗生产体系研究[J].广东农业科学，1999（1）：7-9.
[4] 张雅琼，郭春华.甘薯茎尖分生组织培养研究进展[J].中国农学通报，2005，21（3）：74-76.
[5] 曲艺姣，周清，孙佳，等.美国紫薯试管苗微型繁殖的研究[J].黑龍江农业科学，2013（7）：10-12.
[6] 张清兰，上官新晨，尹忠平，等.紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累[J].食品工业科技，2015（24）：169-174.
[7] 黄萍，马朝宏，颜歉.甘薯试管苗留茬培养研究[J].西南农业学报，2009，22（4）：1191-1193.
[8] 刘明明，杨继红，刘蓁，等.紫薯组织培养初探[J].安徽农学通报，2009（17）：30-31.
[9] 谭德冠，庄南生，黄华孙.组织培养与秋水仙碱诱导相结合培育植物多倍体的应用（综述）[J].亚热带植物科学，2005（1）：77-80.
关键词 紫薯；济薯18号；脱毒苗；芽诱导；快繁技术
中图分类号 S531 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）15-0024-01
紫薯[Ipomoea batatas（L.）Poir.]属旋花科（Convolvulaceae）番薯属，又叫黑薯，其薯肉呈紫色至深紫色[1]。紫薯除了含有普通红薯的营养成分外，还富含硒元素和花青素等营养成分，及丰富的蛋白质、磷、铁及VC、VB、VA等[2]。实际生产中，紫薯病毒病是影响产量和品质的主要因素之一[3]。通过组织培养繁育紫薯脱毒苗是目前防治紫薯病毒病的有效途径之一[4]。本试验通过不同培养基和植物生长调节剂对济薯18号（山东省农业科学院作物所繁育）脱毒试管苗组培快繁进行研究，以期为济薯18号脱毒苗的快繁生产提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试紫薯品种为济薯18号，置于（30±2）℃温室中培养。
1.2 试验方法
1.2.1 培养基设计。MS培养基，pH值5.8～6.0，蔗糖含量3.0%，琼脂0.7%，诱导培养基中6-BA设3个浓度即0.4、0.6、0.8 mg/L、NAA设3个浓度即0.1、0.2、0.3 mg/L，共组合成9种培养基。
1.2.2 外植体接种。取济薯18号植株，去掉大部分叶片、叶柄后，先用0.1%洗衣粉液洗涤，再用蒸馏水清洗干净，置于超净工作台上进行灭菌处理（先在75%酒精中浸泡30 s，再用0.1% HgCl2溶液消毒15～20 min，再用无菌水清洗干净）。在超净工作台上将济薯18号脱毒苗修剪成段，截成1 cm左右并且带1～2个腋芽的小段，在设计好的培养基上进行接种。每瓶接种5个外植体，观察其生长状况。
1.2.3 培养条件。每处理接种9瓶、每瓶接种2株。置于28～30 ℃条件下，日光灯照射培养，光照11 h/d条件下培养[5-6]。
1.2.4 病毒检测。每试管紫薯苗取2片叶，采用斑点酶联免疫吸附测定法检测试管苗是否携带病毒[7-9]。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对脱毒苗的诱导
从表1可以看出，接种后的外植体经过12～20 d诱导，9种培养基上均可生长为体积比较大、质地致密的愈伤组织。所有培养基出愈率均为100%；除培养基M-6及M-9的出根率分别为25.0%和26.6%外，其余培养基的出根率均为100.0%。外植体在培养基M-1、M-2、M-4、M-5上可诱导出芽，其中培养基M-1、M-2出芽率均为100.0%，培养基M-4、M-5出芽率分别为33.3%和36.7%。外植体在培养基M-3、M-6、M-7、M-8、M-9上经过培养只能诱导出愈伤组织，不能诱导出芽。培养基M-1、M-2、M-4、M-5上诱导的外植体出芽平均时间分别为34、30、42、46 d。
2.2 脱毒苗的病毒检测
经检测，M-1、M-2、M-4、M-5培养基上诱导的紫薯苗脱毒率分别为100%、96%、95%和100%。
2.3 脱毒苗的快速繁殖
2.3.1 NAA对脱毒苗生长的影响。从表2可以看出，当NAA浓度为1.0 mg/L时，济薯18号脱毒幼苗5.8 d产生根原基，9.2 d开始出芽，28 d后根长4.5 cm、新生根数8.6条、叶片数4.6片、平均株高6.0 cm。当NAA浓度为0.1 mg/L时，根和茎生长较快，出芽和生根时间相对比较长，说明较低浓度的NAA不利于生根和出芽。当NAA浓度大于1.0 mg/L时，随着NAA浓度的不断提高，出芽及生根时间延长，根长、叶片数及株高不断降低，说明较高浓度NAA处理济薯18号对根、芽、叶片数、株高等的形成是不利的。由此可以说明，0.5～1.0 mg/L NAA能促进济薯18号脱毒试管苗的生长发育。
2.3.2 6-BA对脱毒苗生长的影响。从表3可以看出，不同浓度的6-BA对MS培养基中济薯18号脱毒苗的出芽时间、生根时间、生根数、根长、叶片数和株高均有一定影响。当6-BA浓度为1.0 mg/L时，脱毒苗出芽只需7.6 d，生根需要4.7 d，单株根数4.6条，单株叶片数4.5片。6-BA浓度为0.1 mg/L时，根最长，达5.5 cm，株高生长最快，达5.2 cm。当6-BA浓度为2.5、3.0 mg/L时，抑制了根的形成，幼根数目为0，但对叶片影响较小。说明当6-BA浓度为0.1～1.0 mg/L时，更有利于济薯18号脱毒苗根和芽的生长。
3 结论与讨论
本试验结果表明，济薯18号茎尖分生组织最佳芽诱导培养基为MS 0.6 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培养基中，当NAA浓度为1.0 mg/L时，茎的出芽和生根所需时间最短，培养28 d后叶片数和生根数也最多。但根长和株高在NAA浓度为0.1 mg/L时最高，说明NAA在较低浓度时促进根的生长。在6-BA浓度为0.1 mg/L时，株高最高，根最长；在6-BA浓度为1.0 mg/L时，脱毒苗的生根生芽时间最短，根数最多，叶片数也最多，说明较低浓度的6-BA有利于脱毒苗根和植株的生长。NAA和6-BA在根的数目和根的长度上NAA优于6-BA，在出芽和生根时间上6-BA较NAA快。
4 参考文献
[1] 曹秀敏，张明，熊法亭，等.平薯3号脱毒苗组培快繁技术研究[J].陕西农业科学，2008（6）：19-20.
[2] 段玉云，王新良，金月嵘，等.紫甘薯京薯6号脱毒苗的诱导与快繁[J].西南农业学报，2011，24（2）：835-837.
[3] 张雄坚，房伯平，黄宏城，等.南方薯区甘薯脱毒苗生产体系研究[J].广东农业科学，1999（1）：7-9.
[4] 张雅琼，郭春华.甘薯茎尖分生组织培养研究进展[J].中国农学通报，2005，21（3）：74-76.
[5] 曲艺姣，周清，孙佳，等.美国紫薯试管苗微型繁殖的研究[J].黑龍江农业科学，2013（7）：10-12.
[6] 张清兰，上官新晨，尹忠平，等.紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累[J].食品工业科技，2015（24）：169-174.
[7] 黄萍，马朝宏，颜歉.甘薯试管苗留茬培养研究[J].西南农业学报，2009，22（4）：1191-1193.
[8] 刘明明，杨继红，刘蓁，等.紫薯组织培养初探[J].安徽农学通报，2009（17）：30-31.
[9] 谭德冠，庄南生，黄华孙.组织培养与秋水仙碱诱导相结合培育植物多倍体的应用（综述）[J].亚热带植物科学，2005（1）：77-80.