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目的：对鸡血藤总黄酮提取物中的黄酮类成分进行辨识和鉴定，并对其治疗骨质疏松的靶点进行预测，观察其对核因子κB受体活化因子配体（sRANKL）诱导RAW264.7向破骨细胞分化的影响，并对破骨细胞分化产生影响的作用成分及作用机制进行探讨。方法：采用液相色谱-离子阱-静电轨道阱杂交质谱（HPLC-LTQ/OrbitrapMS）法采集数据后，对各色谱峰的质谱图高分辨一级和二级质谱数据进行解析，与文献数据库进行对比，对各色谱峰进行结构推测和确认。运用SwissTargetPrediction、GeneCards、String平台预测鸡血藤总黄酮18个成分与骨质疏松相关的潜在靶点，在DAVID6.8平台进行基因功能富集和KEGG通路富集分析，Cytoscape软件构建“成分-靶点”网络。体外培养RAW264.7细胞，sRANKL诱导破骨细胞分化，鸡血藤总黄酮干预后，通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性检测盒TRAP染色法评价破骨细胞形成和分化能力，Westernblot法检测雌激素受体（estrogenreceptor，ESR）相关蛋白的表达。结果：从鸡血藤总黄酮提取物中共鉴定了18个黄酮类化合物（芒柄花素、染料木素及美迪紫檀素等），网络药理学预测共得到鸡血藤黄酮化合物治疗骨质疏松的潜在共同作用靶点33个，筛选出16条与骨质疏松相关的信号通路。GO分析和KEGG分析显示关键靶点涉及催乳素（Prolactin）、内分泌（Endocrine）、雌激素（Estrogen）、缝隙连接（Gapjunction）、酪氨酸激酶受体（ErbB）等信号通路，生物过程主要涉及以DNA为模板的转录调控、蛋白质自磷酸化、血管收缩的正向调节等；分子功能涉及蛋白酪氨酸激酶活性、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性及类固醇结合等；细胞组分涉及细胞膜上的膜筏，原生质膜、神经元末端等。实验验证结果显示：与正常对照组相比，sRANKL50ng/mL组TRAP活性明显升高（P＜0.05），与sRANKL50ng/mL组比较，鸡血藤总黄酮50μg/mL组TRAP活性明显降低（P＜0.05）；TRAP染色结果显示，TRAP阳性细胞随着鸡血藤总黄酮组浓度的增大逐渐减少。Westernblot结果显示：与正常对照组相比，sRANKL50ng/mL组ESR1、ESR2蛋白表达明显下调（P＜0.05或P＜0.01），与sRANKL50 ng/mL组比较，鸡血藤总黄酮25、50 μg/mL组ESR1、ESR2蛋白表达明显上调（P＜0.05或P＜0.01）。结论：鸡血藤总黄酮中多种黄酮成分具有调节雌激素的作用，其通过与雌激素受体结合，抑制sRANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化，从而起到预防骨质疏松的作用。