关节软骨细胞传代培养后细胞骨架与糖胺多糖合成变化的研究

来源 :中华创伤骨科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dragonfly
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

观察关节软骨细胞随传代细胞骨架(CSK)及糖胺多糖(GAG)合成量的变化,并探讨两者关系。

方法

雄性8月龄新西兰白兔8只,空气栓塞处死,无菌酶解法分离双膝关节软骨细胞并行单层培养,取原代(P0)及传1、2代(P1、P2)的软骨细胞,分别接种于底部置有圆形盖玻片的24孔板中爬片并于细胞贴附后固定。以免疫荧光抗体对各代软骨细胞CSK染色,利用激光扫描共聚焦显微镜观察各代软骨细胞CSK形态并分别测定其CSK蛋白荧光强度。待每代细胞融合后,换无血清培养液,并于换液后12、24、36、48、60 h分别抽取上清液以阿尔新蓝法检测GAG浓度。

结果

软骨细胞随传代其中间纤维网状结构变松散且核周密集分布减少,而在细胞周边形成的微管突起增多。软骨细胞CSK蛋白荧光强度测定结果显示,P1软骨细胞肌动蛋白荧光强度较P0升高,差异有统计学意义(P< 0.05),而P0与P2、P1与P2差异均无统计学意义(P>0.05);波形蛋白和微管蛋白荧光强度随传代逐渐下降,P0、P1、P2软骨细胞间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。软骨细胞在各个时间点的上清液GAG浓度均随传代逐渐下降,P0、P1、P2软骨细胞间两两比较差异均有统计学意义(P< 0.05)。

结论

软骨细胞随传代其CSK主要成分发生形态及蛋白表达强度的改变,同时其合成基质之一的GAG合成量也随之下降,表明软骨细胞传代后特性的变化,且二者可能存在一定关联。

其他文献
目的观察消癌平注射液联合化疗对复发上皮性卵巢癌的疗效及安全性。方法选择2014年10月至2016年11月在山西医科大学附属肿瘤医院就诊的88例确诊为铂类敏感型复发上皮性卵巢癌患者,按照随机数字表法分为对照组和试验组,各44例。对照组采用紫杉醇+铂类方案化疗,试验组在对照组基础上联用消癌平注射液,比较两组患者的疗效及不良反应发生情况。结果试验组和对照组最终分别入组40例和42例,试验组客观缓解率(O
外泌体是由多囊泡体释放到胞外的小囊泡,可将其所携带的蛋白质、脂质、DNA、miRNA和mRNA等运输至受体细胞,并改变受体细胞的生物学行为。在多发性骨髓瘤(MM)中,外泌体可调节免疫系统、促进血管生成、癌相关成纤维细胞转化、与骨髓间充质干细胞相互作用、增强破骨细胞活性、诱导MM的耐药性等。血液中的外泌体可作为MM的早期诊断标志物,为MM患者提供一种新的诊断、治疗策略。文章就外泌体在MM中的功能与诊
目的分析乳腺血供在乳腺良恶性病变鉴别诊断中的初步价值。方法回顾性分析2017年2月至11月山西医科大学第二医院37例乳腺良恶性病变患者资料。在磁共振成像(MRI)最大密度投影图像上,详细记录患侧及健侧乳腺血管的数目、直径、长度及乳腺供血动脉的显示情况,并根据Sardanellie血供进行评分。以病理结果为金标准分为良性组和恶性组,依据病变最大直径的不同,将全部病例分为≥2 cm组和<2 cm组,比
目的探讨巨噬细胞对卵巢癌细胞血管细胞黏附分子1(VCAM1)表达的影响及其机制。方法利用佛波酯、脂多糖将单核细胞THP-1激活成为巨噬细胞。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巨噬细胞上清中细胞因子水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测巨噬细胞上清对人类卵巢癌细胞HEY、IGROV1的VCAM1 mRNA水平的影响,蛋白质印迹法检测巨噬细胞上清对稳定表达VCAM1的细胞株HEY-VCA
目的探讨子宫颈细胞学不除外高度鳞状上皮内病变的不典型鳞状上皮细胞(ASC-H)在子宫颈疾病诊断中的意义。方法对山西大医院2012年3月至2015年12月子宫颈液基细胞判读为ASC-H的496例患者的年龄、高危型人乳头瘤病毒DNA(hrHPV DNA)及子宫颈活组织检查结果进行分析。结果496例ASC-H患者中,年龄40~49岁患者比例最高,为30.8%(153/496)。154例进行了hrHPV
目的分析子宫内膜癌组织中雌激素受体(ER)的表达特点及其意义。方法回顾性分析2010年1月至2013年1月在太钢总医院住院治疗的100例子宫内膜癌患者的病例资料,选取同期60名健康体检者作为对照。采用免疫组织化学方法检测子宫内膜癌及正常子宫内膜组织中ER的表达水平,分析其与患者临床病理特征及预后的相关性。结果子宫内膜癌组织中ER表达阳性率为45.0%(45/ 100),高于正常子宫内膜组织的20.
低钠血症是目前癌症患者中最常见的电解质紊乱症状,其发病机制与抗利尿激素分泌失调综合征(SIADH)密切相关。低钠血症极少危及患者生命,但会延长住院时间、推迟化疗计划、降低疗效,对患者的生命质量及预后造成不良影响。临床上根据其症状的严重程度和发生时间选择最佳的治疗方案。高渗氯化钠溶液适用于SIADH引起的急性症状性低钠血症患者,而慢性无症状性低钠血症则首选液体限制进行纠正。当液体限制不能达到治疗目的
目的研究泛素连接酶FBW7在影响胶质瘤对替莫唑胺敏感性中的作用,并初步探讨其机制。方法构建FBW7过表达慢病毒,设对照组、替莫唑胺组、FBW7过表达组、FBW7过表达+替莫唑胺组,不同干预方法处理细胞株U251后,分别于36、72 h用相差显微镜及四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析各组细胞抑制率的差异;流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡率。结果两个时间点各组U251细胞存活数量均较对照组增加,与对照
目的探讨乳腺三维断层成像(DBT)对全数字化乳腺钼靶X线摄影(FFDM)阴性致密型乳腺病变的诊断价值。方法回顾性分析山西省人民医院2017年9月至2018年6月312例乳腺病变患者的钼靶图像,FFDM结合DBT的临床诊断依据美国放射学会推荐的乳腺影像报告和数据系统(BI-RADS)并经手术病理证实。结果312例乳腺病变患者中23例FFDM阴性而DBT阳性,其中15例为结构扭曲,8例为结节性病变;1
目的探讨关节镜下增加软点旁辅助入路治疗肘关节僵硬的疗效。方法回顾性分析2016年1月至2017年6月南昌大学第二附属医院骨科采取肘关节镜下治疗20例肘关节僵硬患者资料,男13例,女7例;年龄18~46岁,平均30.8岁。肘关节僵硬时间6~14个月(平均8.4个月)。排除手术禁忌证后予以肘关节镜下松解。术后即刻予以镇痛及分期康复锻炼。末次随访时采取美国特种外科医院(HSS)肘关节评分及Mayo评分系