【摘 要】
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从感染病毒乳鼠脑组织提取总RNA,采用RT-PCR和分子克隆技术将扩增到的G2糖蛋白基因插入含CMV启动子的pcDNA3.1/His质粒载体中,通过脂质体介导转染COS-7细胞,用SDS-PAGE、West
【机 构】
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华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系,军事医学科学院微生物与流行病研究所
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从感染病毒乳鼠脑组织提取总RNA,采用RT-PCR和分子克隆技术将扩增到的G2糖蛋白基因插入含CMV启动子的pcDNA3.1/His质粒载体中,通过脂质体介导转染COS-7细胞,用SDS-PAGE、Western-blot及IFIA方法分别测定表达产物的相对分子量及特异性.结果证明获得正向插入的G2-pcDNA3.1/His重组表达质粒,表达产物的相对分子量为56 ku,与理论预期大小一致,并且可与汉坦病毒H8205株的腹水抗体起特异反应.表明构建的G2-pcDNA3.1/His重组质粒所表达的蛋白为中国汉坦病毒株特有,能在哺乳动物细胞中表达并具有抗原性,重组质粒可应用于汉坦病毒的DNA疫苗研究.
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