【摘 要】
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为了获得纯度较高的造血干细胞供临床应用,我们对人脐带血（Human Umbilical Cord Blood）简称脐血（CB）的分离、提纯和脐血单个干细胞的培养进行了研究,现摘要报导如下:取肝素抗凝
【机 构】
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重庆市第三人民医院,美国印第安纳大学医学院
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为了获得纯度较高的造血干细胞供临床应用,我们对人脐带血（Human Umbilical Cord Blood）简称脐血（CB）的分离、提纯和脐血单个干细胞的培养进行了研究,现摘要报导如下:取肝素抗凝的脐血用Ficoll分离获得低密度（LD）细胞,并将LD细胞采用贴壁方法获取非贴壁细胞（NAL）。周NAL细胞进一步作E—玫瑰花结形成试验,去除T淋巴细胞得到NALT-细胞。然后用CD34单抗作间接免疫荧光标记并用流式细胞仪分离提纯,最后得高标记的CD34#细胞。在含有甲基纤维素培养体系和重组的四种造血因子（rEPO、rhuMGF、rhull—3、rhuGM—CSF）的96孔板孔中,每孔加入1个CD34#细胞,在37°C5％CO2的饱和湿度的二氧化碳培养箱培养14天观察结果。实验结果证明,序列分离提纯技术可大大浓集脐血造血干、祖细胞,集落产率达60～80％,平均为70％。与骨髓相比,脐血中含有丰富的造血干、祖细胞,主要含HPP-CFC,占集落总数的50％,其次是CFu-GM,CFu-GMM和BFU-E,因此脐血有较高的增殖活力。
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