鞣酸通过下调TMEM16A的表达抑制人结肠癌细胞SW620细胞的增殖

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目的:探讨鞣酸对人结肠癌SW620细胞增殖及TMEM16AmRNA与蛋白水平的影响。方法将对数生长期的人结肠癌细胞SW620分为3组,分别是鞣酸低剂量组(50μmol/L)及高剂量组(100μmol/L),以及二甲基亚砜(DMSO)作为空白对照组,培养48、72h。MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期的分布及凋亡情况,RT-PCR和Westernblot分别检测TMEM16A的mRNA水平和蛋白水平。计量资料采用x±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK检验。结果MTT结果显示:鞣酸处理能显著抑制SW620的增殖。高剂量组对SW620细胞的抑制作用比低剂量大。处理48h,高剂量组比低剂量组抑制作用明显(t=15.35,P<0.01);处理72h,高剂量组同样比低剂量组抑制作用明显(t=22.32,P<0.01)。流式细胞检测结果显示:与对照组相比,各个剂量组都能显著将SW620细胞抑制在G0/G1期和S期(F=6782.1、1509.3,P<0.01),G2/M期的细胞比例差异无统计学意义(F=1.37,P>0.05)。各个剂量组处理后,凋亡率差异有统计学意义(F=545.3,P<0.01)。与对照组比较,鞣酸高剂量组的3H-TdR、3H-Leucine掺入量在48、72h均明显低于对照组(P<0.05)。鞣酸低剂量组药物干预48、72h后TMEM16AmRNA相对表达量分别为0.63±0.01和0.62±0.01;鞣酸高剂量组药物干预48、72hTMEM16AmRNA相对表达量分别为0.58±0.01和0.50±0.01,均低于空白对照组的0.85±0.01(F=7.645,P<0.05)。鞣酸低剂量组药物干预48、72h后TMEM16A蛋白相对表达量分别为0.68±0.14和0.65±0.12;鞣酸高剂量组药物干预48、72hTMEM16蛋白相对表达量分别为0.64±0.15和0.63±0.11,低于空白对照组的1.28±0.06(F=4.508,P<0.05)。结论鞣酸能明显抑制人结肠癌细胞SW620细胞的增殖,将其细胞周期阻滞于G1~S期,并下调TMEM16A的mRNA及蛋白水平。
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