H-2D^b四聚体的制备及其在检测LCMV特异性CD8^＋T细胞中的应用

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dsq1980

【摘要】

：

MHC四聚体技术是研究抗原特异性淋巴细胞应答的关键技术之一。为研究H-2D^b基因型（如C57BL／6）小鼠的特异性CD8^＋T细胞免疫应答，需要建立H-2D^b四聚体制备技术平台。首先以RT-PCR方

【作者】

：

刘毅徐丽慧曾学思孙建方何贤辉

【机构】

：

中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所,暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心,暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所

【出处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

：

H-2D^b MHC四聚体淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒原核表达 H-2D^b MHC tetramer lymphocytic choriomeningi

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MHC四聚体技术是研究抗原特异性淋巴细胞应答的关键技术之一。为研究H-2D^b基因型（如C57BL／6）小鼠的特异性CD8^＋T细胞免疫应答，需要建立H-2D^b四聚体制备技术平台。首先以RT-PCR方法克隆H-2D^b重链基因的cDNA，进而构建H-2D^b胞外域与生物素化酶BirA底物肽（BSP）融合蛋白的表达载体，并在大肠杆菌中获得表达。在LCMVGP33-41抗原肽（KAVYNFATC，KAV）和人β2-微球蛋白存在时，通过稀释法复性获得H-2D^b／KAV单体。该单体经生物素化并纯化后与PE-链

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