【摘 要】
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采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从小鼠黑色素瘤总RNA中扩增得到小鼠酪氨酸酶的cDNA.该基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET-22b(+)中,构建表达质粒pET-TYR并转化
【基金项目】
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福建省自然科学基金，福州大学校科研和教改项目
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采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从小鼠黑色素瘤总RNA中扩增得到小鼠酪氨酸酶的cDNA.该基因重组到T7启动子控制下的表达载体pET-22b(+)中,构建表达质粒pET-TYR并转化大肠杆菌Rosetta(DE3).SDS-PAGE及蛋白质序列测定表明,经0.8mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPrG)诱导后,可高效表达重组的小鼠酪氨酸酶,表达量约占菌体总蛋白质的25%,表达产物为包涵体.
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