【摘 要】
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目的研究小干扰RNA(siRNA)的新型阳离子脂质体的制备,考察此脂质体-小干扰RNA复合物对LNCap细胞中靶mRNA的沉默效应。方法采用逆向蒸发法制备新型阳离子脂质体,并加入鱼精蛋
【机 构】
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广西医科大学,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,
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目的研究小干扰RNA(siRNA)的新型阳离子脂质体的制备,考察此脂质体-小干扰RNA复合物对LNCap细胞中靶mRNA的沉默效应。方法采用逆向蒸发法制备新型阳离子脂质体,并加入鱼精蛋白和小牛胸腺DNA以增加其对小干扰RNA的压缩,评价其理化性质;以LNCap细胞为模型,以lipofectamine 2000作为阳性对照,用RT-PCR方法研究脂质体-小干扰RNA复合物对前列腺癌细胞中靶基因Plk-1的沉默效应。结果制备的脂质体(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化铵胆固醇的最佳比例为3∶1,粒径为(117±4.3)nm,Zeta电位为(47±3.6)mV;新型阳离子脂质体小干扰RNA复合物的入胞效率显著提高,荧光显微镜显示LNCap细胞内小干扰RNA含量明显升高。结论本实验所制备的阳离子脂质体具有较高转染效率,脂质体-小干扰RNA复合物的沉默效果显著。此新型阳离子脂质体有望成为小干扰RNA等基因治疗药物的高效传递系统。
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