【摘 要】
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【目的】构建测序大鼠视黄醇结合蛋白-1(CRBP-1)基因短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体。【方法】针对已经筛选确定的大鼠CRBP-1基因RNA干扰(RNAi)有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形
【机 构】
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上海交通大学附属仁济医院普通外科,南京医科大学附属无锡第二人民医院肝胆外科
【基金项目】
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上海市科委重点课题07JC14036
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【目的】构建测序大鼠视黄醇结合蛋白-1(CRBP-1)基因短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体。【方法】针对已经筛选确定的大鼠CRBP-1基因RNA干扰(RNAi)有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经Hpa I和Xho I酶切后的pGCL—GFP载体连接产生shRNA慢病毒载体,命名为Lv-shCRBP-1,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。[结果]PCR鉴定与DNA测序证实合成的Lv—shCRBP-1寡核苷酸链插入正确。【结论】成功构建大鼠CRBP-1基因shRNA慢病毒载体。
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