【摘 要】
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本研究建立了一种以大肠埃希菌作为宿主,表达重组猪促肾上腺皮质激素(pig adrenocorticotropic hormone,pACTH)的新方法.pACTH在N末端与经典猪瘟病毒N末端自切蛋白酶Npro突变
【机 构】
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上海多米瑞生物技术有限公司,上海,201203中国医药工业研究总院,上海,201203;
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本研究建立了一种以大肠埃希菌作为宿主,表达重组猪促肾上腺皮质激素(pig adrenocorticotropic hormone,pACTH)的新方法.pACTH在N末端与经典猪瘟病毒N末端自切蛋白酶Npro突变体EDDIE融合,然后在大肠埃希菌胞浆中以包涵体形式表达,包涵体约占菌体湿重的36.2％.经过复性后的包涵体可以促使EDDIE自酶切,从而获得pACTH.通过优化复性条件,EDDIE-pACTH蛋白的自切率从25％提高至60％.复性液通过酸沉淀,能够去除杂蛋白,经反相色谱纯化后获得纯度为99.56％的pACTH.
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