具重复Kringle结构分子系列缺失体和嵌合体的构建方法及验证

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确定肝细胞生长因子(HGF)、巨噬细胞刺激蛋白(MSP)各4个Kringle结构的共有序列并以此为基础设计公用引物,利用此公用引物可扩增出含不同数目Kringle的系列片段;以不同的组合方式连接,得到了系列缺失体和嵌合体;测序结果表明公用引物的简并性及所扩增序列与理论预期一致.对以此法所构建的HGF/MSP K1缺失体表达后进行活性测定,提出MSP的K1是重要的功能决定区.此外,提出了对内部存在引物酶切位点的cDNA片段的克隆策略.
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