当归补血汤通过PI3K/Akt通路对AngⅡ诱导肥大心肌细胞的保护作用

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhongnanhai10mg
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目的:研究当归补血汤对肥大心肌细胞的保护作用及其与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)/一氧化氮(NO)信号转导通路的关系。方法:体外培养H9C2心肌细胞,采用α-肌动蛋白(α-actin)抗体进行免疫组化法鉴定心肌细胞;用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导H9C2心肌细胞肥大模型,通过BCA蛋白测定法测定心肌细胞总蛋白含量,比较空白组和模型组蛋白含量的不同,以验证AngⅡ诱导H9C2心肌细胞肥大的模型;取同代生长状态良好的细胞分为空白组,模型组,LY294002阻断剂组和10%含药血清组,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组心肌细胞p-Akt,Akt,p-e NOS,e NOS等信号通路的相关蛋白表达,硝酸还原酶法检测各组细胞培养液中NO浓度。结果:免疫组化法鉴定细胞,棕黄色细密颗粒位于细胞浆,其鉴定结果符合心肌细胞特征;BCA测定细胞蛋白,模型组较空白组蛋白表达增加(P<0.05),AngⅡ诱导H9C2心肌细胞肥大的模型建立;Western blot结果显示模型组较空白组p-Akt,Akt,e NOS蛋白表达减少(P<0.05);含药血清组较模型组p-Akt,Akt,e NOS蛋白表达增加(P<0.05),LY294002阻断剂组可消减含药血清的作用。结论:当归补血汤含药血清对AngⅡ诱导心肌细胞肥大起保护作用,其机制之一可能是通过调控心肌细胞PI3K/Akt信号通路实现的。
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