脂肪干细胞旁分泌提取物对新生大鼠脑白质损伤的影响

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目的

探讨脂肪干细胞旁分泌提取物对新生大鼠脑白质损伤的影响,比较小脑延髓池注射途径与颈总静脉注射途径的疗效。

方法

选择3日龄新生SD大鼠73只制作早产儿脑白质损伤模型,建模后24 h将大鼠随机分为实验组46只和对照组27只。实验组再随机分为脑室组和静脉组各23只,分别从小脑延髓池和颈总静脉注射脂肪干细胞旁分泌提取物;对照组再随机分为脑室对照组15只和静脉对照组12只,分别从小脑延髓池和颈总静脉注射等量生理盐水。注射1 d后脑室组和静脉组各随机选择3只大鼠行脑组织冰冻切片生物素荧光染色观察提取物分布;3 d后脑室组、静脉组和脑室对照组各随机选择3只大鼠行苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理形态改变,7 d后4个亚组各随机选择7只大鼠检测髓鞘碱性蛋白(MBP)表达;28 d后剩余大鼠行神经行为学实验(2个对照组合并分析)。实验过程中如有大鼠死亡,补足各组大鼠只数。

结果

建模后24 h内无大鼠死亡,分组后的实验过程中实验组死亡3只,对照组死亡4只,均予以补充。实验组两种注射途径下均可见脂肪干细胞旁分泌提取物迁移至脑部病灶区域,且小脑延髓池注射途径脂肪干细胞旁分泌提取物入脑数量多于颈总静脉注射途径。HE染色结果显示,脑室对照组脑白质区域细胞损伤严重,发生大范围梗死,可见微小梗死灶;实验组损伤较轻,其中脑室组较静脉组胼胝体结构更完整。脑室组和静脉组MBP半定量评分分别低于脑室对照组和静脉对照组[(0.7±0.3)分比(3.4±0.4)分,(1.7±0.3)分比(3.3±0.3)分],脑室组低于静脉组,差异有统计学意义(P<0.05)。脑室组和静脉组悬吊实验和旷场实验评分均高于对照组[(2.9±0.2)分、(1.9±0.2)分比(1.3±0.1)分,(11.6±1.1)分、(10.4±1.1)分比(9.0±1.3)分],脑室组高于静脉组,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论

脂肪干细胞旁分泌提取物能显著改善脑白质损伤早期和远期预后,且小脑延髓池注射途径优于颈总静脉注射途径。

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