【摘 要】
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目的从微量海洋微藻样品中测定出脂肪酸、甾醇和游离氨基酸的含量。方法取20mg左右干重海洋微藻,加入对照品对氨基苯甲酸和C19∶0脂肪酸,Bligh-Dyer法将氯仿相和水-甲醇相分
【机 构】
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宁波大学、浙江省海洋生物工程重点实验室
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目的从微量海洋微藻样品中测定出脂肪酸、甾醇和游离氨基酸的含量。方法取20mg左右干重海洋微藻,加入对照品对氨基苯甲酸和C19∶0脂肪酸,Bligh-Dyer法将氯仿相和水-甲醇相分开。氯仿提取总脂,皂化,调pH小于1,氯仿-正己烷(1∶4)提取,提取物用质量分数14%BF3-CH3OH甲酯化后再用三氟双(三甲基硅烷基乙酰胺)处理,正己烷定容后用岛津QP2010GC-MS分析仪分析脂肪酸和甾醇含量;水-甲醇相过Dowex-50阳离子交换树脂,氨水洗脱,七氟丁酸酐异丁醇酰化酯化衍生后用NCI源在SIM模式下进行氨基酸的GC-MS分析。结果脂肪酸和甾醇的方法回收率为93%~107%,氨基酸的方法回收率为61·1%~102·7%之间。方法的重现性也较好。选取巴夫藻(Pavlovasp·)进行分析,可初步确定出26种脂肪酸和11种甾类化合物,含量在0·017~9·288mg·g-1之间,而19种游离氨基酸的含量则在0·04~2·21mg·g-1之间。结论使用一份样品,可以在岛津QP2010气相色谱质谱联用分析仪上,实现可靠的脂肪酸、甾醇和游离氨基酸的定性定量分析。
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