【摘 要】
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目的:利用pGhost系统构建抗后酸化保加利亚乳杆菌.方法:利用载体pGhost9:ISS1经复制型转座构建突变体,之后在pH 4.3条件下,突变细胞用含终质量浓度2000 μg/mL青霉素处理5h.
【机 构】
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河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001河北省农产品加工工程技术研究中心 河北保定 071001;中国科学院微生物研究所 北京 100080;中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京 1000
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目的:利用pGhost系统构建抗后酸化保加利亚乳杆菌.方法:利用载体pGhost9:ISS1经复制型转座构建突变体,之后在pH 4.3条件下,突变细胞用含终质量浓度2000 μg/mL青霉素处理5h.将处理后的菌液涂布在含终质量浓度2 μg/mL红霉素的MRS平板上,长出的菌落分别点种pH 4.3和pH 6.5的MRS平板进行筛选,在低pH值条件下生长不良或不生长的菌株即目的菌株.经进一步检验,筛选发酵性能与出发菌株相当,而贮藏期后酸化能力大为减弱的菌株.将筛选出的抗后酸化菌株通过低温刺激,使转座后的载体重组,载体部分从染色体上切除,并经高温培养后丢失.剔除载体后的突变型菌落是食品级突变体,为红霉素敏感型.结果:获得3株抗后酸化保加利亚乳杆菌菌株,其生物学性状稳定,回复突变率低.
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