【摘 要】
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[目的]本文旨在研究猪脾转移因子(TF)对新城疫(ND)病毒弱毒疫苗La Sota株的免疫增强作用及机理,为兽医临床防控提供理论依据.[方法]以4种不同剂量La Sota疫苗株分别单独、与TF联合免疫SPF鸡,14d后以ND病毒(NDV)参考强毒F48E9株(104.7 ELD50)进行攻毒,采用蛋白质芯片技术测定鸡外周血IL-6、IL-10、IL-16和IL-21浓度,并以血凝抑制(HI)试验和荧光定量RT-PCR方法分别检测鸡ND HI抗体效价和F48E9株的病毒血症水平.[结果]攻毒保护试验表明,单
【机 构】
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福建农业职业技术学院,福建福州350119;南京农业大学动物医学院,江苏南京210095;兆丰华生物科技(南京)有限公司,江苏南京211102;派生特(福州)生物科技有限公司,福建福州350500;福
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[目的]本文旨在研究猪脾转移因子(TF)对新城疫(ND)病毒弱毒疫苗La Sota株的免疫增强作用及机理,为兽医临床防控提供理论依据.[方法]以4种不同剂量La Sota疫苗株分别单独、与TF联合免疫SPF鸡,14d后以ND病毒(NDV)参考强毒F48E9株(104.7 ELD50)进行攻毒,采用蛋白质芯片技术测定鸡外周血IL-6、IL-10、IL-16和IL-21浓度,并以血凝抑制(HI)试验和荧光定量RT-PCR方法分别检测鸡ND HI抗体效价和F48E9株的病毒血症水平.[结果]攻毒保护试验表明,单独免疫105.17、104.17、103.17和102.17 EID5o剂量时疫苗攻毒保护率分别为100％、55％、0％和0％,半数保护量(PD50)为12023 EID50;对应剂量联合免疫时疫苗攻毒保护率分别为100％、75％、0％和0％,PD5o为6918 EID50;对照组(非免疫有攻毒)和空白组(非免疫非攻毒)死亡率分别为100％和0％.对10417 EID50免疫剂量进一步检测分析表明,免疫后,联合免疫鸡IL-6、IL-1O、IL-21和ND HI抗体效价(log2X)比单独免疫最多时分别提高了254.95 pg/mL、62.10 pg/mL、1.51 pg/mL和2.6,其中ND HI抗体效价差异极显著(P＜0.01);攻毒后,联合免疫鸡IL-10、IL-16、IL-21和病毒血症阳性率比单独免疫最多时分别降低了428.61 pg/mL、167.81 pg/mL、1.48 pg/mL和20％,其中IL-16、IL-21差异极显著(P＜0.01).[结论]本文结果显示,TF可提高La Sota株弱毒疫苗的免疫保护率及免疫后IL-6、IL-10、IL-21介导的免疫应答、ND HI抗体效价,降低疫苗PD50及攻毒后IL-16、IL-21介导的炎症反应、IL-10介导的免疫应答抑制作用、病毒血症.本文明确了TF对La Sota株弱毒疫苗具有较好的免疫增强作用,为疫苗免疫佐剂研发和ND防控提供参考.
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[目的]研究伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)CTO-S对于病毒复制的影响.[方法]利用3\'RACE和5\'RACE鉴定CTO-S的全长序列.验证CTO-S是否具有编码多肽的能力.Red重组方法构建CTO-S缺失株以及回复突变株.分析野毒株、缺失株和回复突变株复制的差异.利用RNA pull down联合质谱的方法筛选与CTO-S互作的宿主蛋白.利用RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipi
[背景]苯酚废水作为一种毒性强、难降解的废水而备受关注.目前,微生物燃料电池(microbial fuel cell,MFC)已经广泛用于苯酚废水的降解,MFC的产电效果和苯酚的降解效率与反应器内的微生物群落有着密切关系.[目的]为了提高MFC的产电效果及对有害物质的降解能力,需要对MFC中苯酚的降解和微生物群落结构进行探索.[方法]分别在开路和闭路情况下,利用高效液相色谱(HPLC)测试MFC对苯酚的去除率;利用16S rRNA基因高通量测序技术分析阴极室中微生物群落的变化.[结果]与开路控制相比,闭路
[背景]诺如病毒(Norovirus,NoV)是引发全球人类急性胃肠炎的主要食源性致病原,具有广泛的遗传多样性,其中GⅡ.17型是亚洲地区的优势流行株,危害最为严重.研究表明,通过基因工程技术制备的诺如病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)具有良好的免疫保护作用,是目前NoV疫苗研发的主要思路.[目的]利用大肠杆菌(Escherichia coli)原核表达系统制备GⅡl.17型诺如病毒的VLP,为GⅡ.17型NoV疫苗的研发奠定基础.[方法]合成GⅡ.17型NoV衣壳蛋白VP1的基
[背景]碱性磷酸酶作为工具酶被广泛应用于各个领域,在免疫学检测方面应用较多的是PhoA家族的碱性磷酸酶,尚无关于PhoD家族的碱性磷酸酶在免疫学检测方面的研究.[目的]筛选出一株产高酶活性PhoD家族碱性磷酸酶的细菌,并将其phoD基因进行克隆表达,研究PhoD的酶学性质,为PhoD家族的碱性磷酸酶在免疫学检测方面的应用奠定一定的基础.[方法]采取有机质丰富的土样在有机磷平板中进行细菌分离,以4-硝基苯磷酸二钠盐(4-nitrophenyl phosphate disodium salt hexahydr
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[背景]唾液酸苷酶是一类水解唾液酸糖复合物末端唾液酸残基的糖苷水解酶,广泛存在于动物和微生物中,具有重要的生物学功能.[目的]克隆一个长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)唾液酸苷酶基因(blsia42)并在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达,探讨该重组酶的酶学性质.[方法]从长双歧杆菌中克隆唾液酸苷酶基因(blsia42),构建重组表达质粒pET-28a-blsia42并在大肠杆菌BL21(DE3)中异源表达.BlSia42粗酶液经Ni-NTA亲和层析纯化后研究其酶学
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[目的]DNA磷硫酰化(phosphorothioation,PT)是由硫原子取代DNA骨架磷原子上的非桥联氧原子形成的一种新型DNA修饰.PT修饰除参与组成限制修饰系统外,其更为广泛的生物学功能仍有待揭示.PT修饰现有的检测方法操作复杂、成本高、耗时长,而具有操作简便、成本低、耗时短等特点的酶联免疫检测(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)成为新PT检测方法开发的优选.灭癌素链霉菌(Streptomyces gancidicus)中具有天蓝色链霉菌中PT修饰依
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