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目的 构建热应激损伤大鼠睾丸支持细胞模型并验证其结果,阐明五子衍宗丸干预生精障碍疾病的作用机制.方法 通过在线数据库筛选五子衍宗丸活性单体抗生精障碍疾病靶点,分析靶点的生物学功能和作用通路.以大鼠睾丸支持细胞为研究对象,构建43℃水浴热应激模型,检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成量变化和热休克蛋白70(heat-shock protein70,Hsp70)的表达变化.结果 网络药理学结果显示,五子衍宗丸主要通过调控活性氧水平、细胞外刺激应答等方式干预生精障碍疾病.ROS荧光探针结果显示,与空白组相比,模型组ROS的生成量明显增多,五子衍宗丸干预后ROS生成量明显减少.Western blot结果显示,五子衍宗丸组Hsp70表达量高于空白组且低于模型组.结论 五子衍宗丸可以通过减少ROS生成、降低Hsp70表达,保护热应激的睾丸支持细胞.