论文部分内容阅读
摘要:为了解转人乳铁蛋白羊奶与普通羊奶之间的差异,将两种羊奶的主要成分及其物理性状进行了比较;同时,参考中华人民共和国农业行业标准《转基因植物及其产品食用安全检测——大鼠 90 天喂养实验》(NY/T 1102-2006)进行转基因羊奶食用安全评价。实验结果表明,90天灌喂转人乳铁蛋白羊奶的大鼠与普通羊奶灌喂组血常规值差异不显著(P>0.05);灌喂转人乳铁蛋白的羊奶中、高剂量组与自由采食对照组及普通羊奶中、高剂量灌喂组大鼠血清铁含量及铁蛋白含量差异显著(P<0.05)。转人乳铁蛋白羊奶与普通羊奶具有实质等同性,转基因成分没有干扰机体对其它营养物质的吸收,从营养学角度来评价,转人乳铁蛋白羊奶是安全的。
关键词:转人乳铁蛋白羊奶;安全性评价;血清铁;铁蛋白
中图分类号:S879.1;X954文献标识号:A文章编号:1001-4942(2013)02-0023-05
转基因植物以及转基因植物为原料的提取物近年来逐渐进入人类的食物链。自2010年美国生物科技公司AquaBounty研发出的生长快、个头大的转基因“超级三文鱼”,并获得美国食品药品监督管理局(FDA)安全证书[1],相信在不远的将来动物转基因食品也会进入人们的餐桌,与此同时,转基因食品的安全性备受争议。目前,国内还没有对转基因食品进行安全评价的标准,国际上有63个国家遵循1993年国际经济合作组织(OEDC)提出的实质性等同原则对转基因食品的安全性进行评价。
乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)是一种相对分子量约为80ku的铁结合性糖蛋白,主要存在于乳汁、唾液、精液、鼻腔分泌物等外分泌液或血浆中[2],乳铁蛋白分子生物学结构决定其具有结合铁的能力,由此带来了其它一些重要的生物学功能,如具有抑菌[3]、杀菌[4]、 抗病毒[5]、抗感染[6]和调节机体免疫功能[7],直接或间接激活转录、诱导基因表达作用,对消化道肿瘤具有化学预防作用。泌乳初期人乳中的乳铁蛋白含量明显高于牛乳与羊乳,因此,动物乳人源化,将提高动物乳铁蛋白含量,目前已经获得转人乳铁蛋白的动物种类很多,本实验即涉及到转人乳铁蛋白基因羊奶。
笔者从两个主要方面对转基因羊奶与普通羊奶进行分析,利用统计学方法对转基因羊奶与普通羊奶的主要生产性能指标进行比较,参考中华人民共和国农业行业标准《转基因植物及其产品食用安全检测——大鼠 90 天喂养实验》(NY/T 1102 — 2006)进行饲喂大鼠实验。
1材料与方法
1.1供试材料
含有转人乳铁蛋白的鲜羊奶由上海杰隆生物制品有限公司赠送,普通羊奶取自山东省农业科学院奶羊场,SD大鼠、基础日粮购自山东大学新药评价中心。大鼠血清铁试剂盒、大鼠铁蛋白试剂盒购自上海麦莎生物科技有限公司。
Integrated Milk Testing Fossomatic 5000全自动体细胞测定仪,Integrated Milk Testing Milkoscan FT 6000 FOSS ELECTRIC 乳成分联合测定仪(丹麦 FOSS公司);7020 型全自动生化分析仪(日本日立公司);TaKaRa PCR Thermal Cycler (日本TaKaRa公司)。
1.2实验方法
1.2.1奶样分析上海杰隆生物制品公司提供转人乳铁蛋白奶山羊羊只泌乳2个月的样品共计24份〔含量为(4.2±0.3) mg/ml〕,取普通泌乳2月的山羊羊奶,分别测定其乳脂率、乳蛋白率、乳糖、冰点、均质度和总干物质,重复测定3次。
1.2.2实验动物与分组选取SD大鼠210只,体重约为120~160 g,将实验动物随机分为7组,每组30只,雌雄各半分笼饲养。同种性别的每笼3只,自由进食、饮水,环境温度21~25℃,空气相对湿度40%~60%。
空白对照组(C组):饲喂基础日粮,自由进食、饮水。
普通羊奶灌喂组:根据灌喂的奶量分为 NL组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶0.5 ml);NM组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶1 ml);NH组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶3 ml)。
转乳铁蛋白羊奶灌喂组:根据灌喂的奶量分为TL组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂转乳铁蛋白羊奶0.5 ml);TM组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂 转乳铁蛋白羊奶1 ml);TH组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂转乳铁蛋白羊奶3 ml)。
1.2.3体重对各组大鼠进行90天灌喂,分别测定各组大鼠的体重增加量,重复3次,记录数据。
1.2.4大鼠血清铁含量与铁蛋白含量测定饲喂90天后,空腹禁水禁食12 h后,将大鼠固定在采血固定套中,用大鼠尾预热器对尾部进行预热后进行大鼠尾静脉采血,然后用大鼠血清铁试剂盒、大鼠铁蛋白试剂盒进行检测,方法参考试剂盒说明书进行,重复3次。
1.2.5大鼠血常规测定饲喂90天后,空腹禁水禁食12 h后,肌肉注射复方氯胺酮(1.2 ml/kg)麻醉,采用BD一次性真空采血器(肝素),心脏采血2 ml送检。委托济南舜天医院进行血常规检测,用Coulter-JT 全自动检测仪(美国库尔特仪器公司生产),库尔特公司原配试剂,阻抗法检测,重复3次。
1.2.6统计分析实验数据应用SPSS统计软件进行t检验
关键词:转人乳铁蛋白羊奶;安全性评价;血清铁;铁蛋白
中图分类号:S879.1;X954文献标识号:A文章编号:1001-4942(2013)02-0023-05
转基因植物以及转基因植物为原料的提取物近年来逐渐进入人类的食物链。自2010年美国生物科技公司AquaBounty研发出的生长快、个头大的转基因“超级三文鱼”,并获得美国食品药品监督管理局(FDA)安全证书[1],相信在不远的将来动物转基因食品也会进入人们的餐桌,与此同时,转基因食品的安全性备受争议。目前,国内还没有对转基因食品进行安全评价的标准,国际上有63个国家遵循1993年国际经济合作组织(OEDC)提出的实质性等同原则对转基因食品的安全性进行评价。
乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)是一种相对分子量约为80ku的铁结合性糖蛋白,主要存在于乳汁、唾液、精液、鼻腔分泌物等外分泌液或血浆中[2],乳铁蛋白分子生物学结构决定其具有结合铁的能力,由此带来了其它一些重要的生物学功能,如具有抑菌[3]、杀菌[4]、 抗病毒[5]、抗感染[6]和调节机体免疫功能[7],直接或间接激活转录、诱导基因表达作用,对消化道肿瘤具有化学预防作用。泌乳初期人乳中的乳铁蛋白含量明显高于牛乳与羊乳,因此,动物乳人源化,将提高动物乳铁蛋白含量,目前已经获得转人乳铁蛋白的动物种类很多,本实验即涉及到转人乳铁蛋白基因羊奶。
笔者从两个主要方面对转基因羊奶与普通羊奶进行分析,利用统计学方法对转基因羊奶与普通羊奶的主要生产性能指标进行比较,参考中华人民共和国农业行业标准《转基因植物及其产品食用安全检测——大鼠 90 天喂养实验》(NY/T 1102 — 2006)进行饲喂大鼠实验。
1材料与方法
1.1供试材料
含有转人乳铁蛋白的鲜羊奶由上海杰隆生物制品有限公司赠送,普通羊奶取自山东省农业科学院奶羊场,SD大鼠、基础日粮购自山东大学新药评价中心。大鼠血清铁试剂盒、大鼠铁蛋白试剂盒购自上海麦莎生物科技有限公司。
Integrated Milk Testing Fossomatic 5000全自动体细胞测定仪,Integrated Milk Testing Milkoscan FT 6000 FOSS ELECTRIC 乳成分联合测定仪(丹麦 FOSS公司);7020 型全自动生化分析仪(日本日立公司);TaKaRa PCR Thermal Cycler (日本TaKaRa公司)。
1.2实验方法
1.2.1奶样分析上海杰隆生物制品公司提供转人乳铁蛋白奶山羊羊只泌乳2个月的样品共计24份〔含量为(4.2±0.3) mg/ml〕,取普通泌乳2月的山羊羊奶,分别测定其乳脂率、乳蛋白率、乳糖、冰点、均质度和总干物质,重复测定3次。
1.2.2实验动物与分组选取SD大鼠210只,体重约为120~160 g,将实验动物随机分为7组,每组30只,雌雄各半分笼饲养。同种性别的每笼3只,自由进食、饮水,环境温度21~25℃,空气相对湿度40%~60%。
空白对照组(C组):饲喂基础日粮,自由进食、饮水。
普通羊奶灌喂组:根据灌喂的奶量分为 NL组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶0.5 ml);NM组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶1 ml);NH组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶3 ml)。
转乳铁蛋白羊奶灌喂组:根据灌喂的奶量分为TL组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂转乳铁蛋白羊奶0.5 ml);TM组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂 转乳铁蛋白羊奶1 ml);TH组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂转乳铁蛋白羊奶3 ml)。
1.2.3体重对各组大鼠进行90天灌喂,分别测定各组大鼠的体重增加量,重复3次,记录数据。
1.2.4大鼠血清铁含量与铁蛋白含量测定饲喂90天后,空腹禁水禁食12 h后,将大鼠固定在采血固定套中,用大鼠尾预热器对尾部进行预热后进行大鼠尾静脉采血,然后用大鼠血清铁试剂盒、大鼠铁蛋白试剂盒进行检测,方法参考试剂盒说明书进行,重复3次。
1.2.5大鼠血常规测定饲喂90天后,空腹禁水禁食12 h后,肌肉注射复方氯胺酮(1.2 ml/kg)麻醉,采用BD一次性真空采血器(肝素),心脏采血2 ml送检。委托济南舜天医院进行血常规检测,用Coulter-JT 全自动检测仪(美国库尔特仪器公司生产),库尔特公司原配试剂,阻抗法检测,重复3次。
1.2.6统计分析实验数据应用SPSS统计软件进行t检验