转人乳铁蛋白羊奶生物安全试验

来源 :山东农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qepwq051
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  摘要:为了解转人乳铁蛋白羊奶与普通羊奶之间的差异,将两种羊奶的主要成分及其物理性状进行了比较;同时,参考中华人民共和国农业行业标准《转基因植物及其产品食用安全检测——大鼠 90 天喂养实验》(NY/T 1102-2006)进行转基因羊奶食用安全评价。实验结果表明,90天灌喂转人乳铁蛋白羊奶的大鼠与普通羊奶灌喂组血常规值差异不显著(P>0.05);灌喂转人乳铁蛋白的羊奶中、高剂量组与自由采食对照组及普通羊奶中、高剂量灌喂组大鼠血清铁含量及铁蛋白含量差异显著(P<0.05)。转人乳铁蛋白羊奶与普通羊奶具有实质等同性,转基因成分没有干扰机体对其它营养物质的吸收,从营养学角度来评价,转人乳铁蛋白羊奶是安全的。
  关键词:转人乳铁蛋白羊奶;安全性评价;血清铁;铁蛋白
  中图分类号:S879.1;X954文献标识号:A文章编号:1001-4942(2013)02-0023-05
  转基因植物以及转基因植物为原料的提取物近年来逐渐进入人类的食物链。自2010年美国生物科技公司AquaBounty研发出的生长快、个头大的转基因“超级三文鱼”,并获得美国食品药品监督管理局(FDA)安全证书[1],相信在不远的将来动物转基因食品也会进入人们的餐桌,与此同时,转基因食品的安全性备受争议。目前,国内还没有对转基因食品进行安全评价的标准,国际上有63个国家遵循1993年国际经济合作组织(OEDC)提出的实质性等同原则对转基因食品的安全性进行评价。
  乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)是一种相对分子量约为80ku的铁结合性糖蛋白,主要存在于乳汁、唾液、精液、鼻腔分泌物等外分泌液或血浆中[2],乳铁蛋白分子生物学结构决定其具有结合铁的能力,由此带来了其它一些重要的生物学功能,如具有抑菌[3]、杀菌[4]、 抗病毒[5]、抗感染[6]和调节机体免疫功能[7],直接或间接激活转录、诱导基因表达作用,对消化道肿瘤具有化学预防作用。泌乳初期人乳中的乳铁蛋白含量明显高于牛乳与羊乳,因此,动物乳人源化,将提高动物乳铁蛋白含量,目前已经获得转人乳铁蛋白的动物种类很多,本实验即涉及到转人乳铁蛋白基因羊奶。
  笔者从两个主要方面对转基因羊奶与普通羊奶进行分析,利用统计学方法对转基因羊奶与普通羊奶的主要生产性能指标进行比较,参考中华人民共和国农业行业标准《转基因植物及其产品食用安全检测——大鼠 90 天喂养实验》(NY/T 1102 — 2006)进行饲喂大鼠实验。
  1材料与方法
  1.1供试材料
  含有转人乳铁蛋白的鲜羊奶由上海杰隆生物制品有限公司赠送,普通羊奶取自山东省农业科学院奶羊场,SD大鼠、基础日粮购自山东大学新药评价中心。大鼠血清铁试剂盒、大鼠铁蛋白试剂盒购自上海麦莎生物科技有限公司。
  Integrated Milk Testing Fossomatic 5000全自动体细胞测定仪,Integrated Milk Testing Milkoscan FT 6000 FOSS ELECTRIC 乳成分联合测定仪(丹麦 FOSS公司);7020 型全自动生化分析仪(日本日立公司);TaKaRa PCR Thermal Cycler (日本TaKaRa公司)。
  1.2实验方法
  1.2.1奶样分析上海杰隆生物制品公司提供转人乳铁蛋白奶山羊羊只泌乳2个月的样品共计24份〔含量为(4.2±0.3) mg/ml〕,取普通泌乳2月的山羊羊奶,分别测定其乳脂率、乳蛋白率、乳糖、冰点、均质度和总干物质,重复测定3次。
  1.2.2实验动物与分组选取SD大鼠210只,体重约为120~160 g,将实验动物随机分为7组,每组30只,雌雄各半分笼饲养。同种性别的每笼3只,自由进食、饮水,环境温度21~25℃,空气相对湿度40%~60%。
  空白对照组(C组):饲喂基础日粮,自由进食、饮水。
  普通羊奶灌喂组:根据灌喂的奶量分为 NL组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶0.5 ml);NM组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶1 ml);NH组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂普通羊奶3 ml)。
  转乳铁蛋白羊奶灌喂组:根据灌喂的奶量分为TL组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂转乳铁蛋白羊奶0.5 ml);TM组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂 转乳铁蛋白羊奶1 ml);TH组(饲喂基础日粮,自由进食、饮水,灌喂转乳铁蛋白羊奶3 ml)。
  1.2.3体重对各组大鼠进行90天灌喂,分别测定各组大鼠的体重增加量,重复3次,记录数据。
  1.2.4大鼠血清铁含量与铁蛋白含量测定饲喂90天后,空腹禁水禁食12 h后,将大鼠固定在采血固定套中,用大鼠尾预热器对尾部进行预热后进行大鼠尾静脉采血,然后用大鼠血清铁试剂盒、大鼠铁蛋白试剂盒进行检测,方法参考试剂盒说明书进行,重复3次。
  1.2.5大鼠血常规测定饲喂90天后,空腹禁水禁食12 h后,肌肉注射复方氯胺酮(1.2 ml/kg)麻醉,采用BD一次性真空采血器(肝素),心脏采血2 ml送检。委托济南舜天医院进行血常规检测,用Coulter-JT 全自动检测仪(美国库尔特仪器公司生产),库尔特公司原配试剂,阻抗法检测,重复3次。
  1.2.6统计分析实验数据应用SPSS统计软件进行t检验
其他文献
摘 要:调查了山东省近几年水稻机插秧发展现状,对存在的问题进行了分析,探讨提出了今后山东省进一步发展水稻机插秧的对策。  关键词:水稻;机插秧;对策;山东省  中图分类号:S223.91(252) 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2012)12-0125-03  水稻是我國重要的粮食作物之一,在农业及国民经济中占有举足轻重的地位。传统的水稻种植靠人工插秧,劳动强度大,水稻生产的机械化
期刊
摘 要:利用自动光合测定系统,在人工气候室内研究了CO2浓度、光照强度以及温度与四季草莓“赛娃”、一季草莓“丰香”光合特性的关系。结果表明:在CO2浓度处于正常浓度(350 μmol/mol)或稍偏高浓度(500 μmol/mol)时,丰香的光合作用略强于赛娃;当CO2浓度低于700 μmol/mol时,赛娃的净光合速率与丰香的相差不大,但之后随着CO2浓度的增加,赛娃呈下降趋势,而丰香仍继续持上
期刊
摘要:构建pcDNA3.1-hTERT、pcDNA3.1-SV40 T载体,线性化后,共转染荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞,研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)和猿猴病毒40大T抗原(SV40 T)对荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞体外培养的作用,并对细胞进行RT-PCR检测分析及免疫荧光鉴定。结果表明, hTERT和SV40 T在奶牛乳腺上皮细胞中表达可以有效地延长细胞的体外培养时间,增加细胞传代次数,获得的细胞系
期刊
摘 要:针对山东省农村农业信息化发展需要,结合国家农村农业信息化示范省建设,从系统功能、硬件拓扑、性能、詳细栏目等方面提出了山东省“一村一页”系统的框架设计,为实现“信息下乡”提供平台,从而促进政务公开,构建和谐新农村。  关键词:“一村一页”系统;框架;功能;拓扑结构  中图分类号:TP391(252) 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2012)12-0019-05  截至2010
期刊
摘 要: 采用高效液相色谱法定量分析吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的消解动态和最终残留。吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的添加回收率分别为799%~937%和809%~991%,相对标准偏差分别为22%~40%和18%~28%,吡唑醚菌酯的最低检出量为2×10-10g,在辣椒和土壤中的最低检测浓度为001 mg/kg。吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的消解动态显示,吡唑醚菌酯在辣椒中的半衰期为36~44 d,在土壤中的
期刊
摘要:从山东某地区发生呼吸道症状的奶牛场中采集样品,按常规方法处理后,接种牛肾细胞(MDBK),分离病毒,盲传3代后,接种病料的MDBK细胞出现细胞圆缩、聚集成葡萄串样群落、在单层细胞上形成空洞等病变,且随着传代次数的增加,细胞病变更加规律。对所分离病毒进行TCID50测定,其TCID50值为108/ml;用IBRV特异性引物对分离病毒进行PCR扩增,获得与设计基因片段大小一致的特异性条带,序列测
期刊
摘要:观察奶牛在布鲁氏菌S19疫苗免疫状态下血清凝集抗体的动态变化规律和免疫后奶牛对布鲁氏菌水解素的皮肤迟发性变态反应差异,并探索两者的相关性,寻找选择布鲁氏菌病抗性牛的方法。选择布病阴性的性成熟青年黑白花奶牛50头,注射S19疫苗1×109 CFU/头,定期采集血液测抗体水平,第60天用布鲁氏菌水解素皮内注射,检测变态反应。结果显示,所有免疫牛均能在15天时检测到凝集抗体,30天达到峰值。迟发性
期刊
摘要:利用BHK-21细胞,接种山东济南地区疑似牛流行热病牛高热期的抗凝血,经盲传3代,分离到1株病毒,经RT-PCR鉴定为牛流行热病毒,命名为BEFV-SD。理化特性试验表明:BEFV-SD对热敏感,56℃ 10 min、37℃18 h可被灭活,对乙醚、氯仿等敏感;BEFV-SD可被BEFV阳性血清中和,中和效价为1∶408;将BEFV-SD的G基因与GenBank中公布的BEFV进行同源性比较
期刊
摘 要:利用大白菜已知CBL基因序列,在公共核酸数据库中重新搜索比对大白菜的基因组序列,鉴定出3个新的大白菜CBL基因,并对这3个基因的结构、遗传进化和顺式元件进行了分析,为进一步克隆和研究这些基因的功能提供了有益借鉴。  关键词:大白菜;CBL基因;基因结构;遗传进化;顺式元件  中图分类号:Q785 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2012)12-0007-04  Identif
期刊
摘要:对山东省86家奶牛群体改良(DHI)参测牛场的生产性能数据进行了综合统计,采用最小二乘分析法探究了养殖模式(规模化牧场和小区)及饲养规模对牛只生产性能是否存在影响,同时比较了近年来不同规模奶牛场生产性能变化情况。结果表明,山东省DHI参测奶牛场以规模化牧场为主,牧场的存栏规模以300~600头最多,其次为300头以下、600~1000头、1000头以上。不同养殖模式和养殖规模牛场之间在各项生
期刊