ELISA法检测人血清晚期糖基化终产物及在血液透析病人的应用

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用牛血清AGE(BSA AGE)作为包被抗原 ,采用对氧化糖基化产物———Nε 羧甲基赖氨酸 (CML)特异的抗体 (抗KLH AGE)作为检测抗体 ,建立竞争ELISA检测系统。将该法和荧光分光光度法所测AGE水平进行比较 ,并对 117例长期血液透析 (HD)病人的血清AGE水平进行定量观察。结果显示 :ELISA法检测血清AGE的最低检测限为 0 .1μg/ml,平均批内变异系数 (CV)为 2 .2 % ,批间CV为 9.0 % ,回收率为 97%~ 10 7%。用该法测定的 117例血透病人血清AGE水平中位数为 0 .5 μg/ml,而年龄匹配的正常人中仅有 9.4%的血清AGE含量>0 .1μg/ml。同时用ELISA法和荧光分光光度法检测 44例病人血清AGE ,两种方法所得结果相关非常显著 (P<0 .0 1)。上述结果表明 ,竞争ELISA法测定人血清AGE水平 ,具有方法简便、准确、特异性高和成本低的优点 ,符合临床使用要求 ,可作为反映病人氧化糖基化损伤的一种检测方法。
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