猪肠道α冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wwjms

【摘要】

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为建立猪肠道α冠状病毒(SeACoV)荧光定量检测方法,本研究采用RT-PCR方法扩增SeACoV N基因保守区序列,将其克隆至p EASY-Blunt载体,构建重组质粒p EASY-Blunt-PA-N作为标准阳

【作者】

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赵冠宇黄海鑫张世亨赵翠青陆祎婷夏秀秀倪铭李笨

【机构】

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吉林大学动物医学学院,温州大学病毒学研究所,广西动物疫病预防控制中心,军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2019年1期

【关键词】

：

猪肠道α冠状病毒 N基因荧光定量PCR Swine enteric alphacoronavirus N gene SYBR Green I

【基金项目】

：

国家重点研发计划项目(2018YFD0500104),浙江省青年基金项目(LQ19C180001).

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为建立猪肠道α冠状病毒(SeACoV)荧光定量检测方法,本研究采用RT-PCR方法扩增SeACoV N基因保守区序列,将其克隆至p EASY-Blunt载体,构建重组质粒p EASY-Blunt-PA-N作为标准阳性质粒,以其为模板建立SeACoV的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验验证。结果显示,建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法 Ct值与标准品模板在9.47×101拷贝/μL~9.47×107拷贝/μL范围内呈良好的线

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