来源最广、使用最方便、质量最好的沼气发酵接种物为老沼气池内的污泥,其次为建池前富集制备的菌种。正常使用中的老沼气池内的活性污泥、沼气发酵液、使用多年的粪坑底泥、阴沟污泥、屠宰场污泥、食品加工厂污泥、沤制三个月以上的各种粪便的底泥等,这些原料,在建池前应富集制备。
　　应选择活性较高的污泥,扩大培养,使其逐渐适应发酵原料的环境,最后成为接种物。在实际建池过程中,难以获得大量接种物时,可以采用老沼气池的发酵残余物添加一定量的人畜粪便进行培养的方法解决。如要制备1000公斤的发酵接种物,一般添加400公斤的沼气发酵液和600公斤的人畜粪便混合,堆沤在不渗水的坑里并用塑料薄膜密封,7天后即可作为接种物使用。若没有沼气发酵液,可以用农村长期未动的阴沟污泥500公斤,添加500公斤人畜粪便混合堆沤7天以上使用。若没有污泥,可直接用人畜粪便至少1000公斤进行密封堆沤,但时间要求较长,一般需要3~6个月。