不同还原剂对大豆胰蛋白酶抑制剂的钝化研究

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研究了二巯基苏糖醇(DTT)、亚硫酸钠(Na2SO3)和半胱氨酸(Cys)对大豆胰蛋白酶抑制剂活性的影响。实验在温度80℃,pH7.5条件下反应,并以BAPNA为底物,采用改进的方法测定DTT对大豆蛋白酶抑制剂的钝化作用,最后用SDS-PAGE方法和凝胶排阻色谱法研究其蛋白酶钝化敏感性。通过改进的BAPNA法得出还原剂钝化大豆胰蛋白酶抑制剂由大到小顺序依次为:DTT>Na2SO3>Cys,并通过SDS-PAGE进一步证实了比色法得出的结论。而凝胶排阻色谱法说明了还原剂对大豆胰蛋白酶抑制剂作用使得抑制剂中二硫键被打断,抑制剂结构发生改变,有新的物质生成。所以,得出大豆胰蛋白酶抑制剂的稳定性与二硫键的存在有关。
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