【摘 要】
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目的 探讨HBV X蛋白与细胞色素c氧化酶Ⅲ(COXⅢ)之间的结合作用.方法 采用交合实验验证HBV X蛋白和COXⅢ在酵母细胞内的结合作用,利用离体结合实验证实两者在体外的结合作用,
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院消化研究所,福州,350001福建医科大学附属第一医院消化内科;
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目的 探讨HBV X蛋白与细胞色素c氧化酶Ⅲ(COXⅢ)之间的结合作用.方法 采用交合实验验证HBV X蛋白和COXⅢ在酵母细胞内的结合作用,利用离体结合实验证实两者在体外的结合作用,采用免疫共沉淀实验证实两者在哺乳动物细胞中的结合作用.结果 携带COXⅢ基因的酵母与携带X基因的酵母交合后发生反应,β-半乳糖苷酶(LacZ)活性检测菌落呈现蓝色,离体结合实验Western印迹中出现特异性结合活性反应条带,提示X蛋白和COXⅢ在体外存在直接相互作用,免疫共沉淀实验在相对分子质量为17 000处出现蛋白条带,提示在哺乳动物细胞水平仍能检测到X蛋白和COXⅢ的特异结合.结论 COXⅢ与X蛋白在原核细胞和哺乳动物细胞中均存在特异性结合,HBV可能通过此反应干扰线粒体呼吸链功能及能量代谢过程.
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