PCR-RFLP方法检测医学重要真菌的临床应用研究

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:babycat_hj
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目的:建立并应用PCR-RFLP技术区分临床重要真菌的方法,进行实验研究和临床应用.方法:首先根据医学真菌的18S rRNA基因合成了白色念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、解脂念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉菌和黄曲霉菌等9种真菌的通用引物;建立鉴定医学真菌的PCR-RFLP方法.通过用白色念珠菌感染大鼠,建立了白色念珠菌感染的实验动物模型.将建立的方法用于临床,并与血培养法和协同凝集试验法进行了比较.结果:PCR-RFLP法的灵敏度高于协同凝集试验和血培养法.经过一年多的临床应用,我们分别用PCR结合限制性内切酶鉴定技术、协同凝集试验法和血培养法检测了118例血液病、肿瘤和其他发热患者的血液标本.应用协同凝集试验(CoA)法检出真菌血症19例,阳性率为16.1%.应用PCR和限制性内切酶技术共有40例检出真菌血症,阳性率为33.9%;其中白色念珠菌血症占真菌血症的65.0%,热带念珠菌感染占17.5%,假热带念珠菌感染占10%,光滑念珠菌感染占5.0%,近平滑念珠菌感染占2.5%,为临床不明原因发热患者寻找病因、进行抗真菌治疗提供了参考依据.结论:该技术具有快速、敏感、不需放射性同位素等优点,而且准确性极高,有着较好的临床应用前景.此技术应用于临床将为血液病、肿瘤和免疫抑制患者的诊断和救治工作起到积极的作用.
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