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目的
观察银杏苦内酯B(BN52021)对胰腺微血管内皮细胞(MS1细胞)的作用，探讨其分子机制。
方法采用MTT法确定脂多糖(LPS)抑制MS1细胞存活的最佳浓度和时间，同法确定BN52021增加LPS诱导后MS1细胞存活的最佳浓度。通过实时定量PCR、蛋白质印迹法检测血小板活化因子受体(PAFR)信号通路中腺苷酸环化酶(AC)、磷脂酶A2(PLA2)、磷脂酶C(PLCβ)、酪氨酸蛋白激酶(PTK)和G蛋白耦联受体激酶(GRK)mRNA和蛋白表达量。
结果10 μg/ml LPS作用24 h为抑制MS1细胞存活的最佳浓度和作用时间。50 mmol/L BN52021是最佳干预浓度。LPS诱导后MS1细胞株AC、GRK、PLA2、PLCβ、PTK mRNA表达量分别为4.02±0.14、2.63±0.03、3.31±0.12、2.09±0.08、1.85±0.07，较对照组(均为1)明显上调；BN52021干预后MS1细胞AC、GRK、PLA2、PLCβ mRNA表达量分别为2.35±0.13、1.17±0.14、1.87±0.11、1.65±0.10，较LPS诱导组显著下调，差异均有统计学意义(P值均<0.05)，PTK mRNA表达量为1.83±0.13，与LPS诱导组差异无统计学意义。蛋白印迹法显示各基因的蛋白表达与mRNA表达的变化一致。
结论BN52021能有效地下调LPS诱导MS1细胞后PAFR信号通路中被上调的AC、GRK、PLA2和PLCβ基因表达。