【摘 要】
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目的 :探讨重楼皂苷Ⅰ（polyphyllinⅠ,PPⅠ）通过靶向信号转导和转录激活子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖和诱导凋亡的分子机制。方法 :用不同浓度的PPⅠ处理U251细胞后,分别采用MTT法、锥虫蓝染色计数法和克隆形成实验检测PPⅠ对胶质瘤U251细胞增殖的影响;采用A
【基金项目】
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十堰市科技局引导性项目（编号:19Y15）； 湖北医药学院人才启动金项目（编号:2017QDJZR12;2018QDJZR27;2019QDJZR16）~~；
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目的 :探讨重楼皂苷Ⅰ（polyphyllinⅠ,PPⅠ）通过靶向信号转导和转录激活子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖和诱导凋亡的分子机制。方法 :用不同浓度的PPⅠ处理U251细胞后,分别采用MTT法、锥虫蓝染色计数法和克隆形成实验检测PPⅠ对胶质瘤U251细胞增殖的影响;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,JC-1法检测线粒体膜电位;运用Swiss Target Prediction在线软件预测与PPⅠ相结合的关键因子;采用蛋白质印迹法检测STAT3信号通路相关蛋白的表达情况;最后进行分子对接模拟PPⅠ与STAT3的结合方式及作用模式。结果 :PPⅠ以时间和浓度依赖方式抑制U251细胞增殖（P值均<0.05）。PPⅠ通过线粒体途径诱导U251细胞凋亡（P <0.05）。PPⅠ能够和多种转录因子及蛋白磷酸酶结合,其中与STAT3的结合作用最强（P <0.05）。不同浓度的PPⅠ作用后,U251细胞中磷酸化STAT3蛋白的表达水平明显下调（P值均<0.05）,而STAT3总蛋白的表达量无变化（P值均> 0.05）。PPⅠ的氢原子能够与天冬氨酸（aspartic acid,Asp）-334残基上的氧原子形成氢键,进而增强其靶向STAT3的能力。结论 :PPⅠ通过靶向STAT3抑制神经胶质瘤U251细胞增殖,并诱导凋亡。
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