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目的
探讨微小RNA-204(miR-204)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响和对B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)的靶向作用机制。
方法以45例非小细胞肺癌组织、A549细胞株为研究对象,通过实时定量聚合酶链反应检测miR-204在NSCLC中的表达;转染miR-204模拟物和抑制剂,用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell、划痕实验、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性检测细胞增殖、迁移、凋亡能力变化;构建含有bcl-2 3’-非编码区野生型和突变型的双荧光素酶报告载体,并通过功能恢复实验,验证miR-204与bcl-2的靶向关系。
结果miR-204在非小细胞肺癌组织中的表达(1.28±0.31)较对照正常组织(3.75±0.27)明显降低(P=0.000),bcl-2在癌组织中表达明显增高(3.46±0.40比0.78±0.48,P=0.000),与TNM分期呈显著负相关,与年龄、性别关系差异无统计学意义;miR-204能明显抑制A549细胞的增殖、迁移,并促进细胞凋亡能力(P=0.000)。共转染miR-204和bcl-2野生型3’非编码区双荧光素酶表达载体的A549细胞荧光活性为0.12±0.02,较对照组(0.29±0.03)显著下降(P=0.000),miR-204对细胞的增殖、凋亡、迁移能力的影响可以被过表达bcl-2所恢复。
结论miR-204在非小细胞肺癌中表达下调,可能通过靶向调控bcl-2的表达影响非小细胞肺癌的增殖、迁移、凋亡能力。