论文部分内容阅读
目的 筛选肝内胆管癌敏感的表观遗传学药物并研究其作用机制.方法 采用细胞活力实验筛选对RBE细胞敏感的药物;在多种细胞株上比较其作用;选择最敏感的药物探讨其机制:通过Giemsa染色观察肝内胆管癌细胞经药物处理后的形态学变化,用流式细胞技术检测细胞周期分布,联合流式细胞技术、Western blot检测细胞的凋亡.结果 RBE细胞分别经96种表观遗传学药物处理48 h,27 μmol/L浓度下22种药物对RBE细胞有抑制作用(细胞活力＜60％),组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂有12种,3μmol/L浓度下仅5种药物对RBE细胞有抑制作用,HDAC抑制剂4种;其中,玉米原斑病菌毒素(HC toxin)对多种肝内胆管癌细胞株的抑制作用最为突出;与对照组比较,HC toxin处理CCLP-1细胞48 h后,能引起包括小体凋亡等多种细胞形态变化,能将细胞周期阻滞在G1期(82.93％比48.51％),能通过非半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶.3(Caspase-3)依赖的凋亡途径诱导细胞凋亡.结论 HDAC抑制剂,尤其是HC toxin,通过多种方式对肝内胆管癌细胞产生显著的抑制作用.