【摘 要】
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目的 评价夏枯草水提物抗寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的活性.方法 将IFNAR1-/C57BL/6小鼠分为空白组、模型组、布喹那组(10 mg· kg-1)、夏枯草水提物高剂量组(900 mg·kg-1)
【机 构】
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广州中医药大学实验动物中心,广东广州,510000;广州中医药大学中药学院,广东广州,510006;广州中医药大学第一附属医院,广东广州,510000
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目的 评价夏枯草水提物抗寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的活性.方法 将IFNAR1-/C57BL/6小鼠分为空白组、模型组、布喹那组(10 mg· kg-1)、夏枯草水提物高剂量组(900 mg·kg-1)及低剂量组(450 mg·kg-1),连续灌胃给药12d,每天1次.第1次灌胃给药30 min后,一次性腹腔注射寨卡病毒,制备寨卡病毒感染模型,空白组给予同体积生理盐水.分别于给药第3、5天检测小鼠血清中病毒载量,并观察小鼠12 d的生存情况.体外实验中,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测夏枯草水提物对Vero和HeLa细胞的毒性;通过观察细胞病变(CPE)现象,检测夏枯草水提物对寨卡病毒引起的细胞病变的影响;应用Real time PCR和Western Blot检测夏枯草水提物对病毒核酸复制和蛋白表达的影响;通过不同给药模式实验研究夏枯草水提物可能的抗病毒机制.结果 与空白组比较,模型组小鼠平均生存时间明显降低(P＜0.01),第3、5天血清中病毒RNA拷贝数升高(P＜0.001);与模型组比较,高、低剂量组小鼠平均生存时间提高(P＜0.01),并能明显降低小鼠第3天、第5天血清中病毒RNA拷贝数(P＜0.001,P＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,布喹那组小鼠存活率和病毒RNA拷贝数变化均不明显(P＞0.05).夏枯草水提物体外抗寨卡病毒的半数有效浓度(EC50)=(51.32±2.13)μg·mL-1,治疗指数(SI)=48.71.与空白组比较,模型组能明显检测到病毒核酸复制和蛋白表达升高(P＜0.001);与模型组比较,布喹那组能明显抑制病毒核酸复制和蛋白表达(P＜0.001);不同浓度的夏枯草水提物组均能不同程度上抑制病毒核酸复制和蛋白表达(P＜0.001).不同给药模式实验结果显示,预混给药效果优于治疗给药和同时给药.结论 夏枯草水提物可提高寨卡病毒感染小鼠的生存率,并可明显降低小鼠血清中的寨卡病毒RNA水平.体外实验结果显示,夏枯草水提物能明显减少寨卡病毒引起的细胞病变、抑制寨卡病毒核酸复制和蛋白表达,并可能通过直接杀灭寨卡病毒或者抑制病毒识别和进入宿主细胞发挥抗病毒作用.
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