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目的 BRAF V600E基因痕量突变的筛查可以避免肿瘤患者无效治疗的情况出现。方法用内部竞争性扩增片段提高野生抑制型(WTB)探针对野生型BRAF V600E基因的抑制,提高发生痕量突变的BRAF V600E基因型的检出率。结果当模板DNA浓度在50~200ng/μL时,构建的痕量基因突变实时荧光定量检测方法能够完全屏蔽BRAF V600E野生型基因扩增。该检测方法的灵敏度可以达到0.1%,符合基因痕量突变检测技术灵敏度的要求。在50例疑似结直肠癌患者的结直肠镜活检组织中,构建的该方法检测到BRAF V