【摘 要】
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为找出准确定量分析细胞脂滴的方法,以猪卵母细胞为模型,利用2种非破坏性的形态学方法——三维重建分析法和平面光密度法,通过荧光染料特异性标记脂滴,对单个细胞内脂滴含量
【机 构】
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四川农业大学动物科学技术学院; 重庆市畜牧科学院;
【基金项目】
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重庆市杰出青年基金基金项目(CSTC2010BA1007);国家自然科学基金资助项目(31101701);国家高技术研究发展计划项目(2013AA102502)
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为找出准确定量分析细胞脂滴的方法,以猪卵母细胞为模型,利用2种非破坏性的形态学方法——三维重建分析法和平面光密度法,通过荧光染料特异性标记脂滴,对单个细胞内脂滴含量进行准确定量和对比分析。结果表明:2种方法都能根据荧光图像定量细胞内脂滴,并统计出脂滴大小、密度和分布规律等指标;随机选取100个脂滴含量不等的卵母细胞,三维重建分析法能更准确地反映样本脂滴含量变异情况(变异系数C.V.=0.86),而光密度法的C.V.=0.68;针对同一细胞不同角度的重复观察,三维重建分析法具有更好的重复性(变异系数C.V.=0.07,组内相关系数ICC>0.9),而光密度法C.V.=0.37、ICC<0.4。因此基于激光共聚焦扫描的三维重建法能够更准确地对细胞内的脂滴含量进行定量分析。
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