【摘 要】
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目的:通过RNA干涉的方法抑制乳腺癌细胞中uPA的表达,观察uPA的表达抑制后对肿瘤细胞的体外侵袭能力的影响.方法:(1)构建可以表达针对uPA的siRNA的干涉载体,转染高侵袭性人乳
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,军事医学科学院生物技术研究所发育与疾病遗传学研究室
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目的:通过RNA干涉的方法抑制乳腺癌细胞中uPA的表达,观察uPA的表达抑制后对肿瘤细胞的体外侵袭能力的影响.方法:(1)构建可以表达针对uPA的siRNA的干涉载体,转染高侵袭性人乳腺癌细胞系MDA-MB 231,G418抗性筛选,挑选单克隆株;(2)分别通过RT-PCR和Western Blot的方法检测uPA的表达;(3)平板克隆形成试验检测转染前后肿瘤细胞的克隆形成能力;4Boyden Chamber Assay检测肿瘤细胞体外侵袭能力.结果:(1)可以稳定表达针对uPA的siRNA的单克隆株,uPA的表达水平显著下降;(2)转染了针对uPA的siRNA的单克隆株的克隆形成能力降低;(3)转染了针对uPA的siRNA的单克隆株体外侵袭能力与原代细胞MDA-MB 231相比明显受到抑制.结论:uPA在人乳腺癌侵袭行为中发挥重要的作用,针对uPA的siRNA可以显著降低uPA的表达,从而抑制肿瘤细胞的侵袭,可望成为抗肿瘤侵袭治疗的一种有效手段.
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