【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-515?5p(miR?515?5p)对非小细胞肺癌(non?small cell lung cancer,NSCLC)细胞顺铂敏感性的影响及机制.方法 实时荧光定量PCR(RT?qPCR)检测BEAS?2B、A549及A549/DDP细胞中miR?515?5p的表达情况.A549/DDP细胞分为NC组、miR?515?5p组、si?RING1组及miR?515?5p inh+si?RING1组,CCK?8法检测A549/DDP细胞增殖活性,用WB检测RING1和凋亡相关蛋白的表达情况
【机 构】
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230022 安徽,安徽医科大学第一附属医院呼吸与重症医学科;230022 安徽,安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科;230022 安徽,安徽医科大学第一附属医院肿瘤日间病房
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目的 探讨微小RNA-515?5p(miR?515?5p)对非小细胞肺癌(non?small cell lung cancer,NSCLC)细胞顺铂敏感性的影响及机制.方法 实时荧光定量PCR(RT?qPCR)检测BEAS?2B、A549及A549/DDP细胞中miR?515?5p的表达情况.A549/DDP细胞分为NC组、miR?515?5p组、si?RING1组及miR?515?5p inh+si?RING1组,CCK?8法检测A549/DDP细胞增殖活性,用WB检测RING1和凋亡相关蛋白的表达情况.用双荧光素酶报告基因系统验证miR?515?5p与RING1的靶向关系.结果 miR?515?5p在BEAS?2B、A549及A549/DDP中的表达水平分别为(1.00±0.03)、(0.61±0.03)、(0.31±0.04);A549/DDP细胞转染miR?515?5p mimics后,NC组和miR?515?5p组细胞在24、48、72和96 h时的OD450值分别为(0.61±0.02)、(0.52±0.02),(0.84±0.02)、(0.68±0.04),(1.03±0.03)、(0.79±0.04),(1.08±0.03)、(0.86±0.04);以上指标组间差异均有统计学意义(P<0.05).miR?515?5p组cleaved caspase?3、cleaved PARP和Bax表达水平显著高于NC组,Bcl?2的表达水平显著低于NC组.A549/DDP细胞转染si?RING1、miR?515?5p inhibitor后,NC组,si?RING1组和miR?515?5p inh+si?RING1组细胞在24、48、72和96 h时的OD450值分别为(0.63±0.02)、(0.49±0.04)、(0.58±0.03)、(0.83±0.03)、(0.62±0.05)、(0.80±0.02)、(1.05±0.04)、(0.76±0.03)、(1.02±0.04)、(1.15±0.05)、(0.86±0.03)、(1.12±0.06);以上指标组间差异均有统计学意义(P<0.05).si?RING1组cleaved caspase?3、cleaved PARP和Bax表达水平显著高于NC组和miR?515?5p inh+si?RING1组,Bcl?2的表达水平显著低于NC组和miR?515?5p inh+si?RING1组.结论 miR?515?5p通过靶向下调RING1的表达增强A549/DDP细胞顺铂敏感性.
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